中文摘要：

糖尿病肾病是糖尿病最常见的严重并发症之一，亦是导致终末期肾脏病和糖尿病患者死亡的主要的原因。大量研究表明糖尿病肾小球高滤过率可能与肾小球系膜细胞（MCs）的收缩功能障碍有关，但MCs 功能异常的确切机制尚不清楚；我们等的前期研究揭示其可能与MCs的TRPC6蛋白表达下降有关。本课题拟采用Western blot、定量PCR 、hTRPC6-shRNA 、流式细胞仪、免疫组化和膜片钳技术等试验方法，研究MCs TRPC6的mRNA、蛋白表达的变化、研究TRPC6的变化与NADPH 氧化酶产生的活性氧氧化应激的关系以及NF-κB信号转导的调节机制。观察黄芪总苷(AST)对糖尿病模型大鼠肾病是否具有防治作用，研究高糖状态下培养MCs的TRPC6上述指标变化，在整体、细胞和分子水平上探讨糖尿病肾病的发病机制与AST防治作用和机制，为减轻和延缓糖尿病肾病并发症的产生与防治新药做基础性的研究。

结论摘要：

糖尿病肾病（Diabetic nephropathy，DN）是DM最常见和最严重的并发症之一，约20%～30%的1型糖尿病（Type 1 diabetes mellitus , T1DM）或2型糖尿病（Type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者最终并发DN，其中相当一部分可进展为终末期肾病（End-stage renal disease, ESRD）。DN是糖尿病患者死亡的重要原因。DN发病机制尚未完全阐明，大量研究表明糖尿病肾小球高滤过率可能与肾小球系膜细胞（MCs）的收缩功能障碍有关，但MCs 功能异常的确切机制尚不清楚；我们等的前期研究揭示其可能与MCs的TRPC6蛋白表达下降有关。 本课题采用Western blot、定量PCR 、hTRPC6-shRNA、流式细胞仪、免疫组化等试验方法，研究MCs TRPC6的mRNA、蛋白表达的变化、研究TRPC6的变化与NADPH 氧化酶产生的活性氧氧化应激的关系以及NF-κB信号转导的调节机制。观察黄芪总苷(AST)对糖尿病模型大鼠肾病是否具有防治作用，研究高糖状态下培养MCs的TRPC6上述指标变化，在整体、细胞和分子水平上探讨糖尿病肾病的发病机制与AST防治作用和机制，为减轻和延缓糖尿病肾病并发症的产生与防治新药做基础性的研究。 研究结果显示，高糖能诱导人肾小球系膜细胞的异常增殖和肥大，并显著抑制系膜细胞TRPC6蛋白的表达和钙离子内流，从而损伤系膜细胞活力和收缩功能；高糖诱导系膜细胞损伤的作用可能是通过调节NADPH氧化酶/ROS/Akt/NF-κB信号通路来实现的，在该信号通路中，NADPH氧化酶性ROS生成与Akt信号活化可能是相互平行或相互交叉作用，并共同存在于NF-κB信号的上游；AST对实验性糖尿病小鼠、大鼠和高糖培养人肾小球系膜细胞均具有一定的保护作用，其机制可能与抑制NADPH氧化酶/ROS/Akt/NF-κB信号通路，提高TRPC6表达水平有关。该成果不仅进一步深化了对DN发病机制的认识，为临床治疗DN提供了新的思路与靶点，也为AST进一步开发奠定了扎实的药理学实验基础，具有重要的理论与现实意义。