中文摘要：

组织工程心脏瓣膜(TEHV)具有良好的组织相容性和自我改建能力，决定这种能力的关键是种植具有相应功能的活性细胞，因此，理想种子细胞的选取及其功能重建，是构建TEHV的核心问题。本课题取材绵羊骨髓，体外分离、培养及扩增内皮祖细胞(EPCs)，定向诱导分化为内皮细胞，联合骨髓间充质干细胞(MSCs)定向分化为肌纤维母细胞，将肌纤维母细胞和内皮细胞序贯种植于去细胞化猪主动脉瓣支架，然后置于自主研制的脉动生物反应器中动态培养，进行TEHV的动态构建，最后对构建的TEHV进行结构和功能检测。结果显示，细胞生长良好，瓣叶中有新的基质形成，表面被细胞覆盖，初步成功地构建TEHV。与静态对照组相比，经过脉动应力预适应的TEHV细胞残留明显增多，细胞排列紧密，细胞与支架之间结合更加紧密，同时TEHV结构中Ⅰ、Ⅲ型胶原明显增加，表面Ⅷ因子免疫组化呈阳性表达。结果也证明，脉动应力预适应有利于提高细胞之间、细胞与细胞外基质的粘附能力，增强抵抗流体冲刷能力；脉动反应器预处理TEHV后，分化内皮细胞和肌纤维母细胞生长良好，具有合成与分泌功能，证实EPCs和MSCs应用于构建TEHV是可行的。