中文摘要：

D-氨基酸氧化酶（简称DAAO）是一种以黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）为辅基的典型黄素酶，可特异性催化D-氨基酸的氨基生成相应的α-酮酸和氨。针对DAAO基因在野生菌中分泌表达效果较差的情况，拟从产酶基因的分子水平和工程菌发酵两个方面探讨DAAO基因的高效分泌表达，寻找DAAO基因的表达规律，为DAAO的生产提供理论依据。本实验从三角酵母中克隆DAAO基因，通过内含子的去除、基因密码子的优化、信号肽

结论摘要：

D-氨基酸氧化酶（简称DAAO）是一种以黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）为辅基的典型黄素酶，可特异性催化D-氨基酸的氨基生成相应的α-酮酸和氨。针对DAAO 基因在野生菌中分泌表达效果较差的情况，拟从产酶基因的分子水平和工程菌发酵两个方面探讨DAAO 基因的高效分泌表达，寻找DAAO 基因的表达规律，为DAAO 的生产提供理论依据。本实验从三角酵母中克隆DAAO 基因，通过内含子的去除、基因密码子的优化、信号肽的选择、基因工程菌表达系统的构建和比较等方法，构建相应的大肠杆菌、巴斯德毕赤酵母、汉斯酵母和产朊假丝酵母等工程菌，筛选能够高效分泌表达DAAO 基因的工程菌。并对表达产物的酶学性质进行系统研究，探讨其在医药和食品等行业的新应用。探讨不同发酵策略对酶分泌表达水平的影响，进行发酵动力学和产酶工艺的基础研究。