本项目巧妙设计利用适配体对于靶分子的高选择性高特异性和核酶的催化剪切特征,以核酶-适配体做为可调控的蛋白识别元件,着重针对"荷电体系下适配体-蛋白质复合物的稳定性"、"聚电解质-链霉亲和素-生物素化核酶适配体层层组装界面"、"适配体/脱氧核酶在固相界面的特异型识别/切割能力"和"多种基于适配体的高灵敏度识别新方法"等构建系列评价方案和识别检测新途径,并结合毛细管电泳-激光诱导荧光技术高分辨率高灵敏度的特点和优势,对以凝血酶为代表的蛋白质生物活性大分子实现了选择性捕获、富集、洗脱、检测的新方法。三年内共发表期刊文章13篇(含SCI核心刊物8篇,累计影响因子18.8),参加国内外学术会议10人次,协助指导硕士生和博士生各2名,均已毕业,较好地达成了本基金申请时的设定目标。本项目以生物分子识别技术和分离技术的基础研究为基点,拓展了核酶-适配体类新型亲和分子在快速、高灵敏度、高特异性鉴别多种蛋白质生物大活性分子方面的简便、无需标记的新途径。
英文主题词ribozyme; aptamer; capillary electrophoresis-laser induced fluorescence detection; layer-by-layer assembly; protein