猪卵母细胞对低温极为敏感,当温度低于15℃时易受低温打击导致细胞的骨架结构损伤,甚至死亡,是迄今为止猪卵母细胞超低温保存后存活率仍不能达到理想效果的主要原因。为此,本实验通过对不同成熟阶段的猪卵母细胞经Taxol或CD处理后超低温冷冻保存,分析微管、微丝和中间纤维骨架特异性结合蛋白对骨架系统的保护机制;通过外源tubulin、actin和plection蛋白在卵母细胞内表达对冷冻卵母细胞骨架蛋白表
猪卵母细胞对低温极为敏感,迄今为止猪卵母细胞超低温保存后存活率仍不能达到理想效果的主要原因。对冷冻液解冻液毒性处理与玻璃化冷冻解冻后卵母细胞的活力、微管、微丝分布以及孤雌胚胎的发育进行对比,为探明超低温保存对卵母细胞骨架蛋白损伤机制,提供重要的理论参考价值。本研究证明,玻璃化冷冻对猪卵母细胞发育潜力造成影响,破坏了正常的骨架结构,而且冷冻促发了卵母细胞凋亡的进程,改变了与卵母细胞发育关系密切的线粒体与脂滴的细胞学特性。通过冷冻程序的冷冻液与冷冻承载物的改变,不能取得明显效果。然而通过骨架保护剂Taxol的添加提高了体外培养的卵母细胞冷冻保存的效果。