本项目所研究的新基因(Hetrin)是Netrin基因家族的新成员。为了深入探讨该基因的功能及其与神经系统的关系,本项目首先获得了Hetrin基因全长cDNA序列,并对其基因结构、染色体定位、可变剪接形式等进行了系统研究。采用多组织Dot blot、Northern blot对Hetrin基因的组织表达谱进行了系统研究。随后,采用地高辛标记的cRNA探针进行原位杂交,对Hetrin mRNA在成年大鼠脑内的表达及分布进行了详细研究,为从细胞水平对其基因表达及其生物学功能的研究和进一步阐明其作用机制提供了重要的形态学资料。通过制备Hetrin全长及其结构功能域的一系列原核表达载体和真核表达载体,获得了具有生物活性的Hetrin蛋白,为深入进行其功能研究奠定了重要的物质基础。最后,通过酵母双杂交技术发现Hetrin蛋白可能和另一个神经发育与分化相关基因Neuronatin具有强相互作用。这将有益于对Hetrin作用机理的深入探讨。总体结果显示,Hetrin可能是一个与神经系统发育密切相关的重要基因,对其进行深入研究将有可能在神经细胞突起诱向生长、神经系统可塑性的物质基础以及神经发育的分子生物学机制方面带来重大突破。我们恳切希望能够在基金委的进一步支持下进行更深层次的研究。
英文主题词Hetrin ,Axon guidance ,Structure