中文摘要：

猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻的病原均是冠状病毒，主要感染1－2周龄仔猪，引起腹泻，对养猪业危害较大。新生仔猪只有通过初乳和乳汁获得母源SIgA，才能获得被动免疫，血清中的IgG不能提供免疫保护，唯有通过黏膜免疫才有效。乳酸菌具有益生菌和携带外源基因双重作用。本项目分别将TGEV和PEDV纤突蛋白保护性抗原基因S1和COE克隆到乳酸菌表达载体pNZ8149中，电击转化食品级乳酸乳球菌NZ3900，Nisin诱导，SDS－PAGE和Western-blot检测表明，重组乳酸菌可以表达两种病毒保护性抗原基因，表达的目的蛋白能与两种病毒免疫血清发生特异性结合反应。间接免疫荧光染色结果表明，重组乳酸菌可以将目的蛋白提呈到菌体表面。大量培养含有PEDV COE基因的重组乳酸菌，采用口服方式分别给小鼠、仔猪和妊娠母猪接种，经淋巴细胞转化实验和间接ELISA检测，小鼠和仔猪不仅产生了IgG抗体，而且产生了针对PEDV的黏膜抗体SIgA，妊娠母猪初乳中检测到PEDV SIgA。上述研究结果表明，乳酸菌作为猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病毒保护性抗原基因的表达载体，可以为该两种疾病提供黏膜免疫。