由于细胞的长期分化、三维复合等方面的困难,目前骨骼肌组织的体外三维构建面临巨大的挑战。 本课题组首先进行了成肌细胞的体外培养、增殖和分化研究,明确了成肌细胞的体外活性和分化特性。我们继而尝试制备了用于肌组织复合培养的多种三维支架材料骨骼肌组织脱细胞基质材料;多种表面修饰并铸形的硅酮橡胶弹性材料;优化并平行排列的PGA合成纤维。在此基础上,分别进行了成肌细胞与上述基质材料的体外复合培养,对细胞在不同材料表面的生物活性进行了检测分析, 证实表面修饰的硅酮弹性材料具有优良的生物相容性,能促进成肌细胞的贴附、增殖和肌管形成。针对硅酮材料的弹性、易拉伸、易塑形的特性,我们对体外复合培养的硅酮材料进行了拉伸加载,并复合其他细胞共培养(雪旺细胞、巨噬细胞、神经细胞),探讨体外环境下,不同培养时间、机械牵拉、辅助细胞作用下,构建肌组织中生肌调节因子家族(MRF家族)成员(MyoD、Myogenin等)和成肌收缩标志分子(Desmin、 B-actin,MHC等)表达的差异性变化,从分子和蛋白质水平对体外构建的骨骼肌组织进行分析和检测。我们的研究工作,为骨骼肌组织工程研究提供了初步的基础研究实验支持。
英文主题词skeletal muscle tissue engineering; myoblast; reconstruction in vitro; MRFs; Sylgard 184