1采用SMART cDNA 文库构建技术和本研究中心自己建立的卵巢癌细胞系,构建了一个卵巢癌cDNA 噬菌体表达文库。采用患者的自体血清进行筛选,共筛选2X106克隆,其中第一轮筛选获得15 个阳性克隆。 2 Stratagen 文库构建技术建立了一个卵巢癌cDNA 噬菌体表达文库,用建库患者的自体血清筛选卵巢浆液性癌cDNA噬菌体表达文库,共筛选5 X 105克隆,用4例卵巢浆液性癌混合异体血清筛选2 X 105克隆,结果共获得了82个血清反应阳性的克隆。经单克隆化并体内剪切测序成功73个,通过DNA相似性搜索,发现它们分别代表 31 个不同的抗原, 其中已知抗原基因14 个,无明显同源性的抗原基因17 个。 3 成功筛选IFI16。用免疫组化进行上皮性卵巢癌组织中IFI16蛋白表达的研究,该基因在85%卵巢癌呈弱表达或不表达,但在正常卵巢的上皮细胞、卵泡细胞及间质细胞100%有表达,提示成功IFI16是一个在卵巢癌低表达的基因,为进一步研究机制提供基础。 4其他侯选基因在免疫组化鉴定和统计分析。
英文主题词ovarian neoplasm; tumor-associated antigens