中文摘要：

组织蛋白酶C是细胞内重要的酶类，不仅可以水解细胞内蛋白质，还参与调节细胞生长、免疫及激活其它蛋白酶等多种生理活动，近年来，我们还首次证明组织蛋白酶C mRNA的表达与日本对虾卵母细胞最后生理成熟阶段紧密相关,本研究拟进一步对组织蛋白酶C在日本对虾卵母细胞最后生理成熟过程中确切的功能展开调查，首先应用体外表达技术获得重组组织蛋白酶C,制备其抗体，然后应用免疫印迹、免疫组化、组织培养等多种研究手段，从多个不同角度分析组织蛋白酶C在卵母细胞最后成熟阶段不同发育时序（如生发泡破裂前后、皮质棒形成前后、排卵前后）的时空表达，查明组织蛋白酶C与卵母细胞最后生理成熟过程中主要细胞学事件生发泡的破裂、皮质棒形成及排卵的关系，这不仅对于解明对虾卵母细胞最后成熟的分子机制在学术上具有重要意义，而且还可为解决对虾母体成熟困难的难题开辟新途径，对于革新传统的对虾人工繁殖技术，提高对虾苗种生产产量具有重要应用价值。

结论摘要：

组织蛋白酶C是一种溶酶样半胱氨酸蛋白酶，属于木瓜蛋白酶族，细胞内重要的酶类,不仅可以水解细胞内蛋白质，还参与调节细胞生长、免疫及激活其它蛋白酶等多种生理活动，我们证明了组织蛋白酶C mRNA的表达与日本对虾卵母细胞最后生理成熟阶段紧密相关,进一步对组织蛋白酶C在日本对虾卵母细胞最后生理成熟过程中确切的功能展开调查，首先应用体外表达技术获得重组组织蛋白酶C,制备了抗体，免疫印迹结果发现组织蛋白酶C蛋白只在卵母细胞成熟阶段表达，免疫组织化学定位进一步显示组织蛋白酶C的酶原蛋白只储存在皮质棒中，但Western blot只检测到组织蛋白酶C蛋白酶原（前体），酶活性测定结果也表明组织蛋白酶C比活力在成熟和未成熟的卵母细胞（即皮质棒发生前后）没有变化，酶活性很低，推论组织蛋白酶C与受精时皮质棒的释放以及受精卵外胶膜的形成有关。此外，我们还克隆了卵母细胞成熟促进因子中的调节亚基cyclinB,发现在日本对虾存在三种cylinB转录本，而且在卵母细胞成熟过程中分化表达，表明这三种转录本在卵母细胞成熟过程中具有不同的的功用。以上研究结果对于解明对虾卵母细胞最后成熟的分子机制在学术上具有重要意义。