中文摘要：

通过本项目的研究，在获得万古霉素生物合成基因簇和建立PCR－targeting系统，以及万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌遗传操作系统的基础上，成功构建了一株能够产生"杂合万古霉素"的工程菌。该菌株不合成万古霉素，而是产生了结构类似的糖肽类化合物LYV0701、LYV0702。两化合物均为新化合物，体外抑菌活性均不低于万古霉素，对某些菌的活性高于万古霉素。 利用本项目研究中建立的遗传操作方法和技术，对东方拟无枝酸菌万古霉素生物合成基因簇中可能与N-甲基化反应和卤化反应相关的四个基因vcm12、vcm11、vcm14和vcm8的功能进行体内外的研究，为组合生物合成改造万古霉素提供正确信息。在对该四个基因的敲除和酶活实验中共发现12个万古霉素类似物LH02 ~ LH13，其中有4个为新的万古霉素类似物。此外还完成了万古霉素产生菌东方拟无枝酸菌的全基因组测序和注释；对获得的杂合万古霉素LYV0701进行了初步的动物体内保护试验和药代动力学研究；对万古霉素基因簇的异源表达进行了研究。这些将对抗耐药菌万古霉素类新化合物研发的深入提供有力帮助。