如何获得数量充足、功能良好且具有成骨分化潜能的种子细胞,一直是困扰骨组织工程基础研究与产业化发展的主要问题。具有多向分化潜能的人脐血间充质干细胞(UCB-MSCs)来源充足,细胞含量高,有望成为骨组织工程的种子细胞。然而,目前常用分离方法获得的UCB-MSCs中含有大量混杂细胞,严重影响了UCB-MSCs诱导成骨的成功率和均质性,因此,必须对其进行分选纯化。本项目拟通过单细胞克隆培养及成骨定向诱导鉴定的方法,将UCB-MSCs中具有克隆形成能力的细胞分为成骨分化潜能和非成骨分化潜能的两类克隆群,再经过基因组学分析全面比较两类克隆细胞膜表面蛋白表达谱的差异,去同存异,从中筛选出与成骨分化潜能相关的膜蛋白,进一步通过流式细胞分析、免疫磁珠分选后成骨诱导,最终确定具有成骨分化潜能细胞亚群的特异性分子标志,为建立稳定有效的UCB-MSCs成骨潜能亚群分选与纯化技术提供技术基础和科学依据。
英文主题词tissue engineering; umbilical cord blood; mesenchymal stem cells; osteogenic potential; cell sorting