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用蛋白质组学技术研究水稻Xa21介导的抗病途径
  • 项目名称:用蛋白质组学技术研究水稻Xa21介导的抗病途径
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30370872
  • 申请代码:C130401
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:殷剑宁
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:中国科学院北京基因组研究所
  • 批准年度:2003
中文摘要:

白叶枯病是水稻生产上最为严重的病害之一,具广谱抗性的水稻抗白叶枯病基因Xa21有重要的应用价值。Xa21编码一个类受体激酶,我们用细菌表达的融合蛋白和免疫沉淀获得的水稻植株体内表达的蛋白质证明了XA21具有自我磷酸化活性,磷酸化依赖的信号传导途径是Xa21介导的抗性反应所必需的。拟开展的研究项目将利用蛋白质组学的方法,进一步了解Xa21介导的抗病途径。主要内容包括,提取接种病原物后不同时间的水稻叶片蛋白质,用双向电泳分离后,一方面用Western 技术确定和跟踪XA21的位置变化,获知XA21的磷酸化发生过程及其与抗病反应的关系;另一方面回收发生变化的蛋白点,用质谱分析编码基因,获得抗病相关基因的信息,然后,对候选基因进行序列和功能分析。该项研究除了对操纵Xa21介导的抗病性(如提高抗性、扩大抗病谱等)产生直接的影响外,对其它抗病过程及类受体激酶的作用机理的了解也有重要的意义。

结论摘要:

白叶枯病是水稻生产上最为严重的病害之一,具有广谱抗性的水稻抗白叶枯病基因Xa21有重要的应用价值。研究已表明Xa21 编码一个类受体激酶,具有自我磷酸化活性,磷酸化依赖的信号传导途径是Xa21 介导的抗性反应所必需的。我们在已有的工作基础上,利用Xa21转基因水稻试验材料4021和成熟的蛋白质研究技术,进一步探讨了Xa21 介导的抗病途径。主要内容包括,提取接种病原物后不同时间(0h、1h、2h、4h、8h、1d、3d和5d)的水稻叶片蛋白质,一方面用Western 技术检测水稻叶片中XA21表达量的变化,获知XA21蛋白质组成型表达,与病原物侵染无关;同时,我们试验了XA21的纯化及磷酸化蛋白质的体内检测方法,获得了很好的效果;另一方面,我们用双向电泳技术分离不同时间点(4h、8h、1d、3d和5d)处理的水稻叶片全蛋白,通过胶图分析和质谱技术初步鉴定了45个发生变化的蛋白点,获得抗病相关基因的信息,该项研究除了对操纵Xa21 介导的抗病性(如提高抗性、扩大抗病谱等)产生直接的影响外,对其它抗病过程及类受体激酶的作用机理的了解也有重要的意义。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 6
  • 3
  • 0
  • 0
  • 0
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