项目采用高效液相色谱技术建立了芸薹属蔬菜sulforaphane测定技术体系,对南方主要芸薹属蔬菜的sulforaphane含量进分析结果表明,青花菜、芥蓝中含量最高,同一种蔬菜则是3天苗龄的含量最高,以后含量逐渐降低;采用RACE方法,获得芥蓝黑芥子酶基因全长cDNA序列,序列全长为1852 bp,开放阅读框为1647 bp,编码549个氨基酸,GenBank登录号为DQ767973;采用RACE技术,获得长度为1041 bp的SMT基因cDNA全长;分别构建超表达载体和RNAi载体;建立了高效的青花菜和芥蓝遗传转化体系,获得一批SMT基因超表达转化植株和RNAi转化植株,经分子检测表明,所获转基因植株19.67%为阳性植株;采用荧光定量PCR技术分别对转基因检测阳性植株进行分析表明,超表达转基因植株中SMT基因表达明显增强,RNAi转基因植株中SMT基因表达明显减弱。项目共培养博士后研究人员1名,硕士研究生3名,其中毕业2名,发表学术论文6篇,应邀参加由中国科协主办的青年科学家论坛。
英文主题词HPLC;sulforaphane;SMT;transgenetic;real time quantitative PCR