RNA干扰(RNAi)技术已广泛应用于昆虫功能基因研究,其在害虫防治领域的应用是当前国内外研究热点,昆虫RNAi效应的传递机制是重要研究基础和迈向应用的关键环节。本项目在广东省产学研结合项目的基础上,在已获得小菜蛾系统性RNAi关键基因(SID)的前提下,深入研究重要农业害虫小菜蛾的系统性RNAi特性及功能。采用荧光定量PCR和免疫组化的方法,研究SID组织表达特征;通过RNAi技术及Sf-9真核细胞表达系统,揭示小菜蛾SID活体及离体的功能特性;构建小菜蛾T7噬菌体cDNA文库,筛选SID的互作蛋白。通过系统研究,深入探讨SID基因对吸收及传递外源siRNA的影响及机制,阐明小菜蛾系统性RNAi信号传导途径,丰富以siRNA或dsRNA为有效因子的生物农药的毒理学内容,为开辟害虫防治新领域,创制高效安全具有自主知识产权的"RNA干扰剂"提供理论基础。
Systemic RNA interference;bio-pesticide;the mechanims of RNAi;;
系统性RNA干扰缺失(Systemic RNA interference defective, sid)蛋白在昆虫RNA干扰信号传递过程中发挥着重要作用。RNAi在害虫防治领域有着巨大的潜力,很有可能成为一种新的害虫防治手段,为防治重要农业害虫带来新思路。但昆虫的RNAi机制尚不清楚。本项目利用第二代测序技术,发现了RNAi机制的核心组成成分,并克隆了相关基因,对其的表达特征进行了研究,对其在RNAi过程中的功能进行了研究,对其作用机制进行了初步探索。在此基础上,本项目还探索了利用RNAi结合筛选的靶标基因防治害虫的田间和室内效果,为今后开发基于RNAi技术的新型生物农药提供基础。