中文摘要：

本研究立足于我国丰富的散发性重症肌无力（MG）样本，在建立共享型MG资源库的基础上，首次采用DNA池联合实时动态PCR方法对维生素D受体（VDR）的启动子和外显子区域的SNP进行系统的筛查及鉴定。即先对来自300例散发性MG患者的等量DNA混合构建DNA池，再通过实时动态PCR扩增来估算SNP频率；筛选出频率>10%的SNP后，再采用PCR-RFLP方法对每份MG患者和对照的DNA进行验证；结合临床表型数据，对得到的候选多态位点逐个识别和鉴定；最后对所获得的MG易感基因多态进行多基因相关性分析，力争建立起MG发病的VDR多基因作用数学模型。探索VDR基因多态性与MG的易感性、严重程度和激素近期疗效的关系，对阐明MG的遗传学和免疫学发病机制有重要意义，并为进一步对MG患者早期诊断、分子分型及个体化治疗奠定基础。

结论摘要：

首先我们建立了完善重症肌无力(Myasthenia Gravis，MG)标本库和临床资料数据库。第一阶段，利用RFLP方法完成VDR基因Fok I、Apa I和Tru9I位点基因分型,对其多态性与重症肌无力易感性、严重程度和激素疗效进行分析，发现Tru9I位点多态性可能与成年女性MG的发病风险相关。第二阶段，我们在前期结果的基础上，从以下方面上做了深入的工作（1）完善了重症肌无力的分组资料，对重症肌无力进行分型评价和量表评价研究；（2）通过ELISA方法对MG患者的血浆进行了乙酰胆碱受体抗体（AchR Ab）的检测；（3）对已经收集的500余例重症肌无力和500例健康对照标本采用SNPscan和iMLDR技术进行高通量基因分型，选取了VDR基因、糖皮质激素受体基因、乙酰胆碱受体抗体基因等20余种基因100余个SNP位点进行高通量筛查；（4）同时改进和完善了数据的统计方法，采用SNPstats、Haploview、SHEsis等软件进行高通量SNP分型数据和单倍型的分析；（5）发现了有意义的基因 VDR基因有1个标签SNP（tag SNP）存在相关性，糖皮质激素发现一个启动子区域SNP存在相关性,揭示了VDR基因和糖皮质激素受体基因可能与部分MG患者的易感性有关。出乎预期的是，在CHRNA1、CTLA-4、AIRE等基因区域内，发现了10余个SNP病例组和对照组比较有统计学意义，而其中数个SNP在病例组中与正常人群明显分布差异，值得进一步深入研究；（6）采用数据挖掘的方法，尤其是聚类分析和主成份分析，以发现重症肌无力临床特征的内在联系和与基因多态性之间的关系，深入揭示重症肌无力的发病机制。