中文摘要：

Foxp3（叉/翅状螺旋转录因子）作为重要的免疫抑制调控分子，一直被认为是由调节性T细胞（Treg）特异表达，近来发现部分肿瘤细胞及正常组织细胞也可表达Foxp3，但对其表达的机制和生物学意义并不明确。我们前期研究初步明确了Foxp3在肝癌细胞中的表达及调控特点，功能研究提示肝癌细胞Foxp3的表达可能参与对局部免疫微环境的抑制及促进肿瘤细胞逃避免疫攻击，但具体作用机制尚不明确。因此，本研究主要目的是拟在前期基础上通过体外及在体两个水平，明确肝癌细胞Foxp3表达对局部免疫微环境（包括细胞因子分泌，免疫抑制性细胞亚群、效应性T细胞、以及抗原递呈细胞等）的影响以及免疫效应细胞对Foxp3+肝癌细胞的攻击效应，初步阐明肝癌细胞通过Foxp3表达所参与的肿瘤免疫逃逸的可能机制。以期进一步理解Foxp3在肿瘤细胞中的表达的现象及其生物学意义，为明确肿瘤发病机制及寻求更好的治疗靶点提供研究基础。

结论摘要：

本项目的主要目的是探Foxp3 在肝癌细胞中的表达的现象及其生物学意义,为明确肿瘤发病机制及寻求更好的治疗靶点提供研究基础。研究主要结果显示, FOXP3 在肝癌细胞株中表达,在 179 个肝癌样本中 39 个样本的肝癌细胞表达 Foxp3 蛋白,癌旁及正常肝组织不表达Foxp3 蛋白。Foxp3阳性的肝癌细胞的Foxp3启动子去出现较高的去甲基化水平。FOXP3 基因 SNP 位点 rs2280883 和 rs3761549 的不同基因型频率在肝癌患者组和对照组中的分布差异有显著性(P<0.00001);携带 rs2280883 TT 基因型的个体发生原发性肝细胞癌的风险高于携带 rs2280883 CT 基因型的个体(OR=1.5337, 95%CI=1.0986-2.1411),携带 rs3761549 CC 基因型的个体发生原发性肝细胞癌 的风险高于携rs3761549 CT 基因型的个体( OR=1.9155 , 95%CI=1.3892-2.6411)。肝癌组织样本的临床背景资料经统计分析发现,癌细胞表达 Foxp3 组发生具有较高的远端转移率。FOXP3 基因的功能研究结果表明 HepG2 细胞过表 达 FOXP3 能上调 MMP-1 的表达,且 HepG2 细胞的迁移和侵袭能力提高; MHCC97H 细胞 FOXP3 表达沉默能下调 MMP-1 的表达,且 MHCC97H 细胞的 迁移和侵袭能力降低;此外,HepG2 细胞同时过表达 FOXP3 和敲除 MMP-1 后, 其迁移和侵袭能力显著下降。沉默肝癌细胞FOXP3的表达可显著逆转肝癌细胞对CD4+T细胞增殖抑制的能力促进CD4+T细胞的激活。以上研究进一步表明肝癌细胞中FOXP3的表达水平可能与FOXP3启动子去甲基化水平相关;FOXP3基因单核苷酸多态性(SNP)位点rs2280883和rs3761549的多态性可能与肝癌易感性相关;肝癌细胞中FOXP3可通过MMP-1影响肝癌细胞的迁移和侵袭并参与肿瘤细胞介导的免疫抑制。以上研究发表相关SCI论文4篇，Hepatology审稿中1篇，拟申报专利1项。