中文摘要：

耐药在肿瘤治疗中常见，细胞耐药机制是胃癌研究的一项重要内容。研究表明miRNA表达异常可以通过多种途径参与肿瘤细胞耐药，显示出miRNA在介导肿瘤耐药中的作用。因此，深入研究miRNA表达异常在胃癌耐药中的调控机制具有重要意义。我们拟在前期工作的基础上，以胃癌耐药细胞中呈低表达的miR-497为研究对象，通过细胞转染、DNA甲基化检测，siRNA干扰、转录因子调控等实验手段，主要研究（1）MYC对miR-497表达异常的调控机制；（2）miR-497与 Wnt/β-catenin通路以及MYC之间的调控关系；试图阐明miR-497表达异常的反馈调控途径。此外，拟从细胞、组织和体内实验三个层面进一步研究miR-497参与胃癌耐药的机制及功能，丰富对miR-497全貌的认识，为开展通过调控miRNAs逆转胃癌耐药的研究奠定实验基础和提供重要信息。

结论摘要：

microRNA(miRNA)作为新近发现的转录后调控的重要分子，广泛参与了各种生命活动过程。同时，miRNA在肿瘤发生、发展、预后、治疗以及耐药等过程中也起着非常重要的作用。由于具有保守性和特异性，miRNA还被广泛的用作为肿瘤的诊断、预后以及治疗反应性的生物标志物。胃癌耐药是影响胃癌患者预后的重要因素，研究胃癌细胞对化疗药物的敏感性及耐药的机制具有潜在的临床价值。本课题组发现miR-497在胃癌组织和细胞中均呈显著低表达，同时在胃癌顺铂耐药细胞中进一步表达降低，并可通过靶向调控IGF1R/IRS1信号通路节点蛋白，如IGF1R、IRS1及BCL2介导胃癌细胞对顺铂的耐药。同时课题组还发现miR-34c上游转录起始区的CPG岛甲基化能够引起miR-34c低表达，进而可以通过上调靶基因MAPT的表达，影响胃癌细胞对紫杉醇的治疗敏感性。胃癌的发生发展是一个复杂的，多步骤，多因素的过程。课题组发现miR-145，miR-133a/b在胃癌组织以及胃癌细胞中低表达，并且可以通过靶向抑制SP1从而抑制胃癌细胞增殖、转移和浸润。目前临床工作中，缺少具有较高敏感性及特异性，方便易于获取的用以指示肿瘤患者预后信息的指标。课题组通过分析乳腺癌miRNA高通量信息数据库，发现乳腺癌组织中存在一组与ER受体密切相关的miRNA，能够作为ER受体阳性的乳腺癌病人的预后标记物。与此同时，从肿瘤预后的角度，课题组还通过免疫组化，荟萃分析发现了可能用于预测肿瘤病人的预后标志物，如ERCC1、Smad4、淋巴细胞与单核细胞的比例（LMR）和miR-21。同时，课题组通过芯片及PCR的方法，还发现了一组5个具有临床诊断潜能的，与胃癌组织表达一致的胃癌血浆miRNA标记物(miR-185, miR-20a, miR-210, miR-25 and miR-92b)，为胃癌的早期诊断、干预、治疗及耐药机制研究提供了有价值的参考信息。课题组还发现了miR-4728-3p的表达与HER2的表达呈协同关系，并可指示HER2的表达状态，为临床胃癌、乳腺癌的HER2表达检测提供了有效的补充指标。总之，课题组这些研究将为揭示肿瘤多方面的机制打下基础，并为将来进一步可能服务于临床上提供依据。