前期研究表明黑木耳多酚具有抗氧化、抑制血管平滑肌细胞异常增生的作用。针对国内外对黑木耳抗动脉粥样硬化作用的成分与机理研究较少且不够深入的现状,本项目拟以黑木耳为原料,借助超声波提取器、高效液相色谱等设备提取得到多酚单体,并通过傅里叶红外光谱仪、质谱仪、核磁共振等设备对其结构进行鉴定分析;通过检测清除不同自由基的能力,从量子化学角度研究多酚单体及不同组合的多酚混合物清除自由基的构效关系;通过细胞试验,借助自动酶标分析仪、流式细胞仪等设备从细胞水平研究多酚单体及不同组合的多酚混合物降低ox-LDL、抑制血管平滑肌细胞的异常增生的量效关系;通过生物整体试验,借助生化分析仪、γ放射免疫分析仪等设备从分子水平研究多酚单体及不同组合的多酚混合物抗动脉粥样硬化的机理,并借助神经网络法建立其抗动脉粥样硬化机理的数学模型。本研究将对阐明多酚抗动脉粥样硬化机理奠定理论,为黑木耳的深加工提供理论支持。
Auricularia auricula;polyphenol compounds;fatty liver;vascular smooth muscle cell;atherosclerosis
项目的背景众所周知,黑木耳不仅是食用菌而且是药用菌。关于黑木耳的现代药用研究,始于20世纪80年代,Hammerschmidt发现它有显著抑制人血小板聚集的作用,从而引起关注。2004年,Acharya K et al.发现黑木耳醇提取物具有抗氧化与提高一氧化氮合酶的活性,但他们没有将这些成分的种类、保健作用及作用机理进行深入的研究。 主要研究内容本项目研究了黑木耳多酚单体及不同组合的多酚混合物降低ox-LDL、促NO生成、抑制血管平滑肌细胞异常增生的影响,从细胞水平探讨了其作用的量效关系;通过生物整体试验,研究了黑木耳多酚单体及不同组合的多酚混合物抗动脉粥样硬化的作用,并采用神经网络法建立黑木耳多酚抗动脉粥样硬化的数学模型。 重要成果1)从黑木耳中分离纯化得到槲皮素、δ-生育酚、山奈素和岩藻黄质四种多酚化合物单体;2)降低ox-LDL能力槲皮素>δ-生育酚>岩藻黄质>山奈素,促NO生成能力δ-生育酚>槲皮素>岩藻黄质>山奈素,清除O2.-自由基能力δ-生育酚>槲皮素>山奈素>岩藻黄质,抑制血管平滑肌细胞异常增生能力槲皮素>δ-生育酚>山奈素>岩藻黄质,量效均呈正相关系。3)通过试验确定了它们抗动脉粥样硬化的能力槲皮素>δ-生育酚>岩藻黄质>山奈素,并且发现槲皮素:δ-生育酚:山奈素:岩藻黄质为2:4:3:1的比例时,这四种多酚抗动脉粥样硬化的作用最强。 关键数据: 分离纯化得到槲皮素、δ-生育酚、山奈素和岩藻黄质四种单体多酚化合物,其中得率(以干黑木耳计)分别为4.65mg/g、3.89mg/g、2.97mg/g、1.64mg/g;当槲皮素:δ-生育酚:山奈素:岩藻黄质为2:4:3:1的比例时,ICR小鼠服用量为0.2 mg/10g b.w的这四种多酚混合物时,具有明显的清除体内过多的自由基、阻止平滑肌细胞异常增殖、改善血清与肝组织的氧化状况、促进粪醇的排泄,表现出较强的抗动脉粥样硬化作用。 科学意义本研究的成果为“食疗”法防治心脑血管疾病提供理论基础,为振兴我国保健食品、促进保健食品健康发展服务,对充分利用我国的资源优势,提高黑木耳的附加值具有重要意义。