为了保护内耳毛细胞和促进毛细胞再生来治疗感音性耳聋,本课题采用具有高生物活性(在F摩尔级)神经保护肽(ADNF-9)作用的基因,根据真核细胞表达后加工原理,设计一种可分必表达功能肽(ADNF-9)的重组腺伴病毒,通过体外毛细胞培养,AAV转导研究ADNF-9对细胞的保护和再生促进作用,通过微量渗透泵技术将重组AAV转入实验动物的内耳毛细胞,使用病理和电镜技术研究ADNF-9的促进细胞再生和防止细胞凋亡作用,使用ABR、DPOAE检查听神经功能,目的是找到治疗感音性耳聋的基因治疗方法,解决具有高生物活性的神经保护肽如何应用到听神经的治疗问题,为临床上治疗感音神经性耳聋提供理论依据。
为了保护内耳毛细胞和促进毛细胞再生来治疗感音神经性耳聋,本课题采用具有高生物活性的神经保护肽作用的基因,根据真核细胞表达后加工原理,使用PSSHG-CMV-NT4-ADNF-9,PGF140和PAAV/Ad三种质粒共转染293包装细胞,制备ADNF-9重组AAV,检测重组病毒对体外培养新生大鼠耳蜗组织的转染来观察对毛细胞细胞的保护和再生促进作用,通过微渗透泵把重组AAV转导入实验动物的耳蜗,使其在内耳毛细胞上表达,使用ABR和DPOAE检查听力功能,使用病理和电镜技术来研究ADNF-9促进内耳毛细胞的再生和防止细胞的调亡作用,目的是找到治疗感音神经性耳聋的治疗方法,解决具有高生物活性的神经保护肽如何应用到内耳的问题,为临床上治疗感音神经性耳聋提供新思路 。