生物脱氮除磷是国内外污水处理领域研究的热点问题,对污水处理中功能菌的监测是进行研究的必要手段。本课题采用荧光标记DNA探针的固相杂交法进行水处理中功能菌检测方法研究,普通荧光法容易受到固体基质背景的干扰,使用长寿命荧光标记物可利用时间分辨的方法消除固体基质背景和生物分子的背景荧光。本研究合成了几种性质稳定发光强度高的Eu3+等稀土离子的双功能长寿命发光螯合物探针,并以欧洲亚硝化单胞菌(ATCC 19718)作为污水处理中关键性功能菌研究的对象,对捕获探针浓度、杂交温度、杂交时间及洗涤时间等条件的进行了优化考察;将欧洲亚硝化单胞菌、大肠杆菌、多粘芽孢杆菌等三种纯菌株建立了一个混合菌体培养体系,检验探针的选择性能。检测结果表明所设计的探针选择性较好。在定性检测的基础上,对目标探针的浓度开展了初步的定量研究,得到了最低检出限为1.39×10-11 moll-1 的结果。该检测方法还具有简便、快速、灵敏、选择性和特异性好的优点,为污水处理中关键性功能菌监测分析技术的发展提供了重要的科学依据。课题还将合成的长寿命荧光稀土离子螯合物用于核酸适配体和免疫分析中,建立了新的分析方法。
英文主题词Ammonia-oxidize bacteria; DNA hybridization; Time-resolved fluorescence; Wastewater treatment