中文摘要：

DNA-PKcs是细胞DNA双链断裂非同源末端连接修复（NHEJ）途径的关键分子，其功能过表达会导致癌细胞的辐射耐受，放射治疗失败。因此，DNA-PKcs是提高癌症放射治疗敏感性的重要分子靶点。在本研究中，我们利用生物信息学方法预测了DNA-PKcs抗原表位，并表达纯化了抗原性高且与其他蛋白没有同源性的DNA-PKcs蛋白片段DPK3。通过噬菌体抗体库结合酵母双杂交技术获得了anti-DPK3-scFv抗体基因，体外试验表明原核表达的抗体蛋白具有很好的特异性。将anti-DPK3-scFv基因稳定转染HeLa细胞，导致HeLa细胞的增殖能力下降、辐射敏感性增强、辐射诱发的DNA双链断裂的修复能力降低。anti-DPK3-scFv能有效抑制DNA-PKcs对其Akt底物的磷酸化作用。将稳定表达anti-DPK3-scFv的HeLa细胞系接种裸鼠成瘤后，观察到电离辐射对该肿瘤生长的抑制作用显著高于转染了对照质粒的HeLa细胞形成的肿瘤。本研究获得了特异性的anti-DNA-PKcs specific scFv antibody，细胞和动物实验证实其具有抗癌细胞增殖和放射增敏作用。