中文摘要：

垂体GH腺瘤约占所有垂体良性肿瘤的20%，可分泌过多的生长激素，导致肢端肥大症，显著增加呼吸系统疾病和恶性肿瘤的发病率；影响心血管系统，导致诸如高血压、心肌病和心脏瓣膜病发病率的增加和过早死亡 ，严重影响人民的身体健康，但其发病机制是复杂的，至今尚未完全明确。由Wnt蛋白介导的细胞信号转导通路在物种间高度保守，它影响胚胎的发育，细胞极性、粘附、凋亡和肿瘤的发生，并与其它细胞信号通路相互作用。近年来，该通路在其他许多肿瘤中的作用，已被广泛研究。但系统研究该通路在GH腺瘤发病机制中的作用，尚未见文献报道。本课题研究WNT通路中各基因在垂体GH腺瘤中的差异表达；通过反义RNA技术封闭高表达基因或基因重组、转染技术激活低表达基因，研究该通路在GH腺瘤发生、发展中的作用，探讨各差异基因间的相互作用及影响，寻找以Wnt信号通路为靶点的肿瘤治疗方法。

结论摘要：

垂体GH腺瘤约占所有垂体良性肿瘤的20%，可分泌过多的生长激素，导致肢端肥大症，显著增加呼吸系统疾病和恶性肿瘤的发病率。由Wnt蛋白介导的细胞信号转导通路在物种间高度保守，它影响胚胎的发育、细胞极性和粘附、凋亡和肿瘤的发生以及和其它细胞信号通路之间的相互作用。本课题最初拟研究WNT通路中各基因在垂体GH腺瘤中的差异表达；对差异表达基因在体外，通过反义RNA技术封闭高表达基因或基因重组、转染技术激活低表达基因，研究该通路在GH腺瘤发生、发展中的作用，探讨各差异基因间的相互作用及影响，寻找以Wnt信号通路为靶点的肿瘤治疗方法。研究过程中在动物实验部分，因涉及成熟的垂体腺瘤动物模型仅有催乳素腺瘤模型，本课题组又进行了催乳素腺瘤动物模型的Wnt通路相关研究。采用雌激素受体拮抗剂氟维斯群处理催乳素MMQ细胞和生长催乳素肿瘤细胞系GH3细胞，结果提示氟维斯群抑制了MMQ和GH3细胞的生长、增殖和分泌，抑制了Wnt4和ERα的表达，上调了WIF1的表达。另外，表观遗传学研究部分发现DNA甲基化酶抑制剂DAC和组蛋白去乙酰化酶抑制剂TSA均能上调WIF1的表达，并且两者有协同作用。说明氟维斯群可以通过抑制ERα通路影响催乳素腺瘤和生长激素腺瘤细胞的生长、增殖和分泌；ERα通路与Wnt通路间有可能存在相互作用；WIF1有可能是催乳素腺瘤细胞系的抑癌基因，其低表达的原因与表观遗传学相关。后续又进一步建立并验证了大鼠催乳素模型，应用氟维斯群治疗大鼠催乳素腺瘤，大鼠肿瘤体积减小，血清催乳素水平下降，并且ERα的mRNA和蛋白水平均被下调，β-catenin的mRNA和蛋白水平也被下调，两者之间具有正相关性；Wnt通路抑制因子WIF-1在氟维司群治疗后表达上调，并呈现剂量依赖关系，和ERα水平的表达呈负相关，进一步对WIF-1的启动子位点进行了甲基化比例的检测，发现-111bp位点的CpG位点的甲基化水平和WIF-1表达水平呈负相关。说明Wnt经典通路参与了氟维司群的抗肿瘤作用，Wnt通路抑制因子WIF-1的表达水平变化与其启动子甲基化有关。本研究自开展至今，实验结果已经发表SCI论文6篇，培养博士研究生4名。达到了课题申报时的预期结果。