本研究以新海16号、新海20号、97006、K-222为外植体,通过不同浓度的激素组合成功地诱导获得了体细胞胚并进一步发育成苗,结果显示,海岛棉愈伤诱导最适培养基为,MSB添加0.1mg/LKT及0.1mg/L2,4-D,愈伤组织诱导率达95%以上;体细胞胚形态建成的最适条件为 MSB中KNO3加倍并添加2.0g/L 凝固剂gelrite 、0.1g/L天冬酰胺、0.1g/L谷氨酰胺及0.05mg/L IBA,其中10%体细胞胚胎可分化出形态建成完整的幼苗。本研究成功建立海岛棉体细胞胚胎发生再生体系,再生率达到50%以上,周期为6-7个月。 此外成功的将SATI抗蚜基因转入新海16品种获得了转基因海岛棉抗虫棉,通过PCR检测初步筛选转基因植株,阳性率为25%,将阳性植株嫁接,成活率达到90%以上。并以海岛棉新海16为材料,选取胚性愈伤组织初期,胚性愈伤组织后期,体细胞胚形态建成初期的愈伤组织和对照无菌苗叶片进行石蜡切片观察和基因组DNA提取,初步说明了体胚中出现细胞凋亡现象。并用DDRT-PCR方法寻找出了胚性愈伤初期的差异表达基因。
英文主题词gossypium barbadense;plant regeneration system;SATI gene;genetic transformation