中文摘要：

原发性肝癌是严重威胁人民健康的恶性疾病，深入了解肝癌的发生发展机制至关重要。我们通过对收集的国家肝癌样本库大量样本的芯片表达分析，以及对肝癌细胞系的检测，发现干细胞更新相关基因ZFX在肿瘤样本中高表达。本项目拟在肝癌细胞上通过RNA干扰技术，研究内源性ZFX对肿瘤增殖，周期，凋亡等影响，初步确认ZFX的基因功能，通过免疫组化在大样本上，确认ZFX的表达和肿瘤临床及病理的相关性。同时计划通过深入的动物实验，多细胞的功能验证，以及ZFX过表达后的功能研究，使得其功能更加明确。在机制方面，拟通过干扰后的表达芯片检测，干扰后干细胞标志物的表达变化以及ZFX基因的chip-on-chip技术，gel-shift等方法，明确被其调控的下游基因，特别是肿瘤干细胞相关基因的表达变化，明确其在肿瘤干细胞自我更新中的作用。希望通过本项目，对寻找肝癌诊断及预后判断指标和干预靶点奠定基础。

结论摘要：

原发性肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一。目前手术切除或肝移植仍是治疗肝癌最有效的方法，但是肝癌患者的五年生存率仍然较低，这与术后缺乏有效的靶向抗肿瘤药物有关，因此对肝癌发病机制的研究显得格外重要，虽然有较多研究报道，但是至今仍未阐明肝癌发生和发展的具体分子机制。我们利用全基因组表达谱芯片技术，通过对HCC肿瘤组织及瘤旁组织进行比对显示ZFX在病人肿瘤组织样本中表达明显高于正常组织样本。人zfx基因位于X染色体上，结构上非常类似位于Y染色体上的基因zfy，编码的蛋白是X染色体耦联锌指蛋白（zinc finger protein X-linked, ZFX）。随着ZFX在干细胞和肿瘤干细胞中的功能被发现，近来研究报道zfx基因在多种类型肿瘤细胞中表达并发挥重要生物学功能。但是，到目前为止，ZFX在肝癌中的表达情况及其相关生物学功能尚无文献报道。本研究将通过对肝癌组织芯片的研究明确ZFX的表达和肝癌患者预后的关系，并研究ZFX在肝癌中的基因功能及其分子机制。通过前期的研究，我们首先证明了ZFX在肝癌标本中的表达是普遍偏高的，同时，我们还发现ZFX的表达水平不但与患者的总生存率和无瘤生存率呈负相关，并且与肝癌干细胞标志物EpCAM和CD44呈正相关。其次，我们证明了ZFX在不同肝癌细胞系中的表达水平是不一样的，并建立了稳定干扰ZFX的肝癌细胞系，我们发现干扰ZFX基因后，肝癌细胞的增殖、克隆形成、侵袭、迁移能力以及成瘤性明显被抑制。最后，我们通过表达谱芯片检测并验证发现ZFX是通过影响β-catenin的稳定性来调控肝癌的进展的。另外，我们还发现ZFX与肿瘤干细胞重要通路存在密切关系。以上表明ZFX可作为肝癌预后判断的重要指标，并且 ZFX在肝癌细胞恶性生物学行为中发挥着重要作用，且与肝癌干细胞存在密切联系，因此继续探索ZFX调控肝癌进展的具体分子机制，将为肝癌诊断以及靶向干预治疗提供新的科学依据。