眼眶外伤、肿瘤、先天畸形及炎症等均可能造成眼眶骨缺损,严重影响患者的外观及视觉功能。目前的各种修复材料均不能自体化,始终作为异物留在体内,存在感染、移位、排异等并发症。组织工程技术是骨修复治疗的希望。但目前组织工程骨构建中的细胞来源多靠体外培养获得,存在耗时、安全性及经济耗费等问题。如何快速、安全并且有效地把骨髓中具有成骨能力的细胞分离浓缩,是组织工程骨应用于临床的基础。但现有的干细胞浓缩分离方法均不适用于构建眼眶组织工程骨。本课题拟采用红细胞裂解技术快速收集有核细胞,并针对眼眶修复材料的特点,应用自设计体外干细胞- - 材料融合装置将干细胞快速与支架材料融合,进行眼眶骨缺损修复的研究。从而为组织工程骨大规模的应用于临床奠定基础。
Orbital defects;Tissue engineering;Red cell lysis;Beta-tricalcium phosphate;Repair
目前组织工程骨构建中的细胞来源多靠体外培养获得,存在耗时、安全性及经济耗费等问题。本项目应用红细胞裂解技术将骨髓血中具有成骨能力的干细胞快速分离浓缩,经自制体外干细胞-材料融合装置与β-磷酸三钙(β-TCP)支架材料复合,构建组织工程骨修复犬眶壁10 mm直径骨缺损。通过计算浓缩前后干细胞及有核细胞计数,材料内有核细胞浓度及干细胞浓度分别提高53倍及49倍;实验组CT影像随访可见材料逐渐吸收并伴有新骨的形成,同时伴有骨改建的发生;Micro-CT和组织学检查显示实验组新生骨与周围眶壁已形成骨性连接,实验组有6侧(75%)眼眶骨性缺损基本被完全修复,而对照组仅有一例只在缺损最大直径形成骨性连接,统计结果有显著性差别(P<0.05)。以上研究证明利用红细胞裂解处理构建的组织工程骨能够有效修复眼眶骨缺损,新生骨同时发生适应眶壁结构的生理功能改建,此研究为组织工程技术能够大规模应用于临床提供了条件和参考。在此项目的资助下,课题组已在IVOS、Biomaterials、Stem Cell Dev、J Biomed Mater Res 、J Oral Maxillofac Surg、Eur Cell Mater、Biomed Mater及J Craniofac Surg等SCI收录杂志发表论文14篇,影响因子大于3分的论文5篇,总影响因子35.76, 发表核心期刊文章5篇;申请专利2项,其中已授权专利1项。从事本项目有关的毕业博士3名,硕士1名。目前还有1名博士研究生及1名硕士研究生从事于本课题相关的研究工作。在国际交流方面,我们多次参加国际国内会议,就本项目的研究成果做交流汇报。