糖酵解是寄生虫能量代谢的主要途径,乳酸脱氢酶(LDH)为其末端酶。通常认为LDH是胞内蛋白,但根据前期对日本血吸虫LDH(SjLDH)及华支睾吸虫LDH(CsLDH)的研究我们认为寄生蠕虫LDH具有膜蛋白的特性,是理想的药物及疫苗靶标。本课题拟对三种模式寄生蠕虫(日本血吸虫、细粒棘球绦虫、欧猬迭宫绦虫)LDH进行研究,以揭示寄生蠕虫LDH作为膜蛋白的普遍意义,并从分子水平探讨其结构与功能的关系及作为药物和疫苗靶点的应用价值。本课题获得了日本血吸虫LDH(SjLDHA、SjLDHB)、细粒棘球绦虫LDH(EgLDH)及欧猬迭宫绦虫LDH(SeLDH)全长cDNA序列,通过对其编码蛋白质序列的生物信息学分析、基因克隆表达及功能研究,证实了寄生蠕虫LDH具有跨膜蛋白的特性,位于蠕虫表皮表面;对SjLDHB、EgLDH的酶学特性进行了分析,结果表明在生理条件下其主要催化丙酮酸还原为乳酸的反应;通过重组蛋白抗体与重组蛋白体外酶活性抑制试验,证实重组蛋白及主要表位抗体可有效抑制重组蛋白酶活性,提示LDH是潜在的药物及疫苗作用分子,课题基本达到了预期目的,具有重要的理论意义及应用价值。
英文主题词parasite;lactate dehydrogenase;membrane protein;structure;function