中文摘要：

肝硬化是目前临床上治疗难度较大的常见病，胆汁淤积既能引发肝硬化，又是肝硬化过程中可能出现的会进一步加重纤维化程度的并发症。研发能同时抑制胆汁淤积和肝纤维化的药物有较为重要的意义。我们最近研究发现维甲酸能同时抑制胆汁淤积和肝纤维化；维生素D3已知能抑制胆汁淤积，我们初步发现它可以抑制肝星状细胞活化，并与维甲酸具备协同作用。本研究拟进一步深入研究维甲酸、维生素D3能够抑制肝星状细胞活化的分子机理及二者合用产生协同作用的机制，并验证二者合用是否对肝实质细胞的胆汁生成等过程有更好的抑制，并阐明其机理。然后用动物模型来验证二者合用是否对胆汁淤积性肝纤维化有更好的治疗作用，并通过病理切片、血清指标、胆酸、胆红素等生化分析，以及各相关基因的表达、活性变化的分析来阐明其机理。最后采用人原代肝实质细胞和肝星状细胞来验证其效果。本研究可能成为肝硬化，尤其是胆汁淤积性肝硬化治疗新方案并为新药研制提供潜在新靶点。

结论摘要：

肝硬化是目前临床上治疗难度较大的常见病，胆汁淤积既能引发肝硬化，又是肝硬化过程中可能出现的会进一步加重纤维化程度的并发症。研发能同时抑制胆汁淤积和肝纤维化的药物有较为重要的意义。在本研究中我们采用动物模型、原代细胞及细胞系等不同研究对象系统研究了维甲酸、维生素D3抑制胆汁淤积性肝纤维化的效果与可能的分子机制，结果表明，维生素D3的原型形式虽然在前期研究中能够抑制肝星状细胞系LX-2的激活，并且与维甲酸有协同效果，但在动物实验中则不能抑制胆管结扎大鼠的肝纤维化，与维甲酸也没有协同效果； 在胆管结扎诱导的肝纤维化大鼠模型中，维甲酸与维生素D3 的活性形式（OH）2VD3能够协同抑制胆汁淤积和肝纤维化，但在星状细胞系LX2和人原代细胞中则没有协同作用的效果，在肝实质细胞中是否有协同作用还在进行深入的研究当中。本项目还深入探讨了维甲酸抗肝纤维化的分子机制，发现其可以抑制肝纤维化信号通路关键节点蛋白Integrinα的蛋白表达，这种抑制是转录后调控，高表达维甲酸受体RAR/RXR会加强其抑制效果，更深入的细节还在研究当中。我们还发现维甲酸还可以抑制其它关键肝纤维化相关蛋白如CTGF的表达，这种抑制是在mRNA水平上进行的，将CTGF启动子序列构建荧光素酶报告系统发现，维甲酸可以抑制CTGF的启动子活性。由于肝纤维化关键基因 COL1A1、TGFβ1 的调控均发生于转录水平，为了研究其转录调控机理，将两个基因的启动子构建成萤光素酶报告系统，后期实验发现其经过改造可以成为肝纤维化药物的体外高通量筛选模型。我们利用该模型筛选得到了EGCG、双环醇、天麻素等一系列有直接肝纤维化抑制活性的化合物，同时与化学专业的同事们进行合作，改造与合成了多个系列的新化合物，如 S7、16-4 等，申请了多个国内、国际专利。并在动物实验中验证了多个药物的抗纤维化效果。总之，本研究可能成为肝硬化，尤其是胆汁淤积性肝硬化治疗新方案，并为抗肝纤维化新药研制提供了有力的工具，推动抗肝纤维化药物的迅速发展。