中文摘要：

文献报道和本研究组工作证实，骨髓来源细胞（BMCs）通过基质衍生因子1-趋化因子受体4的趋化作用移行至脉络膜新生血管（CNV）区域，参与CNV形成。BMCs因其定向移行能力可望作为药物载体实现CNV的靶向治疗，但参与CNV的具体细胞类型尚不明确。本项目从探讨BMCs中参与CNV的具体干细胞类型入手，着重研究经基因修饰后的载体干细胞特异性趋化、靶向治疗CNV的潜能。利用干细胞分离培养、流式分析、移行分析、脉络膜铺片和荧光活体成像等方法，探讨各种干细胞的移行能力和参与CNV生成的情况；利用腺病毒基因转导和流式分选，实现干细胞的基因修饰和目的蛋白的高效表达；利用细胞共培养体系、CNV动物模型、组织学观察和视觉电生理检查等，观察基因修饰过的干细胞在体内外抑制CNV、保护视网膜的作用。从全新的角度探索干细胞结合基因疗法用于CNV靶向治疗的潜能，为CNV相关眼病的治疗提供新策略。

结论摘要：

文献报道和本研究组工作证实，骨髓来源细胞（BMC）可动员趋化移行至脉络膜新生血管（CNV）区域，参与CNV形成，但参与CNV的具体细胞类型尚不明确。本研究组推测，BMC因其定向移行能力可望作为药物载体实现CNV的靶向治疗。“干细胞向CNV的特异趋化”是整体项目“CNV细胞疗法”实施的基础，是研究的重点，因此，在项目实施过程中，本研究组从探讨BMC中参与CNV生成的具体干细胞类型入手，观察了动物模型体内干细胞参与CNV生成的全过程，比较了BMC中各干细胞类型向CNV趋化的特异性，进而筛选获得良好的细胞载体。在对这一基础的论证中，我们结合采用了经典的组织学方法和新兴细胞影像技术—活体荧光成像观察BMC在动物CNV模型体内的生物学行为。活体荧光成像提供对体内骨髓细胞的实时追踪，大大拓展了我们对BMC参与CNV生成的全动态过程的了解；组织学为活体荧光成像的发现提供进一步的确凿证据，使我们对此“基础” 达到多层面多角度的论证，同时也从技术层面上提高了本项目的研究水平。通过这一部分研究，证实了骨髓基质干细胞（MSC）相对于其他种类骨髓来源干细胞具有向CNV的特异趋化能力，确立了MSC是后续治疗研究的良好细胞载体。同时，我们还对MSC特异趋化的机制进行了探索，从分子角度进一步验证MSC的趋化能力和动态过程。此后，本研究组利用腺病毒基因转导技术，实现了MSC的基因修饰和抗新生血管形成蛋白的高效表达，建立了保留向CNV特异趋化能力又能高表达抗新生血管形成因子的细胞载体。通过常规静脉输入，此基因修饰过的MSC载体能够特异趋化至动物CNV病损内，成功抑制CNV的发生发展，最终证实了结合基因疗法和干细胞疗法对CNV进行靶向治疗的可行性。 另外，作为对本项目研究内容的补充，我们还研究了衰老、高血糖情况下干细胞参与CNV生成情况及其可能的机制。该部分研究将为干细胞疗法用于复杂病情患者CNV治疗提供必要的理论和研究基础。 综上所述，本项目证实了干细胞向CNV的特异趋化现象，利用这一现象并结合干细胞的体外修饰，可达到CNV的靶向治疗。本项目从全新的角度探索了干细胞结合基因疗法用于CNV靶向治疗的潜能，为CNV相关眼病的治疗提供了新策略。该疗法不但可望应用于一般情况下CNV的治疗，而且在伴随其他全身病理状态时（如高血糖、衰老），也具有一定可行性。