极低丰度的蛋白质分子的检测,特别是癌症早期诊断的标志物的检测极其困难,伴随着近年来单细胞组学的发展的需要,尚无法对单细胞内蛋白质分子进行精确定量。本项目拟研制自主知识产权的单分子蛋白质检测微流控芯片,将邻位连接反应与数字PCR芯片整合在一起,研制一种对蛋白质精确定量的单分子蛋白质检测新方法-数字邻位连接反应,为蛋白质分子的单分子检测及单细胞内蛋白质分子精确定量提供一种新工具,解决低丰度蛋白质精确定量的难题。数字PLA方法具有检测灵敏度高、特异性强、样品消耗低、操作简单、检测设备常见等优点,它不仅能检测血清中的痕量肿瘤标志物蛋白质分子,受干扰度小,而且可以对单细胞内微量的蛋白质分子进行单分子计数,比现有的单分子酶联免疫技术更加简单、样品消耗更少、灵敏度更好、特异性更高,对癌症的早期诊断、肿瘤的发生、发展、药物筛选、单细胞分析及肿瘤干细胞的鉴定等研究具有重要的应用价值和实用价值。
英文主题词single protein molecule counting;microfluidic chip;digital proximity ligation assay;single cell;cancer diagnosis