中文摘要：

本课题组在国家自然科学基金的主任基金（30240044和30370299）资助下，已成功分离和培养了胚胎大鼠神经干细胞,并初步研究了膜整连蛋白beta4在神经干细胞增殖、分化中的作用。同时，表明RB蛋白和REN基因参与了此信号转导通路。在此基础上，拟使用特异性强的RNAi技术来阻断膜蛋白功能，采用Western blotting/RT－PCR技术以及激光扫描共聚焦显微技术等研究方法，深入研究膜整连蛋白beta4介导神经干细胞增殖、分化信号转导途径，说明RB蛋白和REN基因在其所参与的膜整连蛋白beta4介导的神经干细胞增殖、分化信号转导途径中的特定作用，并且初步研究相关调控机制，为搞清膜整连蛋白beta4在细胞增殖、分化调控中的功能提供实验证据。该系列研究对搞清膜整连蛋白beta4在细胞增殖、分化调控中的功能具有重要的理论意义。

结论摘要：

本项目旨在研究膜整联蛋白beta4 (integrin beta4)在调节细胞增殖、分化和凋亡信号转导中的作用及机制。首先检测了beta4在中枢神经系统的表达，发现神经干细胞向神经元分化过程中，beta4的表达显著增高。用RNAi技术阻断神经干细胞中integrin beta4表达，发现分化被显著抑制，FGFR2可能参与了此过程。当阻断神经元中beta4的表达，神经元存活被抑制，细胞发生凋亡，且通过调节NADPH 氧化酶活性和细胞内的ROS水平来实现的。先前研究发现磷脂酰胆碱特异性磷酯酶C和integrin beta4在功能上有密切关联。本课题组利用PC-PLC特异性抑制剂D609来研究其调节神经干细胞和神经元存活、凋亡的作用。发现PC-PLC 在神经干细胞和神经元存活中具有重要作用，ROS的适中水平对于细胞的存活是必要的。另外研究发现PC-PLC 介导了大鼠骨髓基质干细胞向神经元分化的信号转导，bFGF能够通过降低线粒体膜电位和ROS水平维持D609诱导产生的神经元的分化状态及存活。本项目的研究对阐明integrin beta4在细胞增殖、分化和凋亡中的功能具有重要的理论意义。