中文摘要：

采集太湖鹅不同产蛋阶段的卵巢，分离卵泡颗粒细胞，用流式细胞仪测定卵巢中各发育阶段卵泡颗粒细胞凋亡率和G2/M+S期细胞比例；提取总mRNA, 用定量RT-PCR的方法测定各阶段卵泡颗粒细胞凋亡抑制基因（Bcl-2）的mRNA含量。构建Bcl-2基因真核表达质粒，转染到体外培养的卵泡颗粒细胞中进行瞬时表达，测定该基因表达对体外培养的卵泡颗粒细胞的抗凋亡作用；同时，将Bcl-2基因真核表达质粒以基因治

结论摘要：

卵泡颗粒细胞（GC）是卵泡发育的基础。检测了F1-F4、SPF、SYF和闭锁卵泡GC凋亡，结果表明正常时约有1%GC凋亡，凋亡率增加则卵泡向闭锁方向发展，>10%出现明显闭锁特征。构建bcl-2基因真核表达质粒和基因干扰表达载体，转染bcl-2基因质粒增加bcl-2表达，结果GC分裂增快，凋亡率显著下降；经基因干扰降低Bcl-2表达则颗粒细胞凋亡显著增加。表明bcl-2可以促进GC分裂，抑制凋亡。构建3对抑制素α基因干扰载体对GC进行基因干扰，降低抑制素表达，结果细胞凋亡增加，雌激素分泌下降，孕酮分泌上升。向培养液中添加不同浓度的血管活性肠肽（VIP）和褪黑素（MT），结果表明VIP以时间和卵泡发育阶段依赖方式抑制颗粒细胞凋亡。MT可以升高颗粒细胞Bcl-2表达水平，降低Bax表达水平，通过影响BB值（Bcl-2与Bax比例）来抑制细胞凋亡发生。同时，MT可以显著降低GC上GnRH受体转录，并随着GnRH受体下降，GC凋亡减少，激素分泌增加。由此推断GC凋亡受更上游的信号调控。为此，深入研究褪黑素等对GC中上游激素受体的表达，搜索影响GC的关键基因，可为改善传统生殖调控技术注入新思路。