中文摘要：

不育对人类的困扰日渐迫切，世界卫生组织把精索静脉曲张列为男性不育的首位病因，但精索静脉曲张损害生精功能的分子机制仍未能充分阐明，临床亦有较多争议。我们的前期研究证实，14-3-3 ε基因在睾丸中表达水平的明显下调与实验性精索静脉曲张大鼠的生精细胞凋亡增加相关。14-3-3 蛋白家族成员可以通过 14-3-3-Bad/Bim-Bax等途径参与细胞凋亡过程，但其与Bim之间的中间环节尚不清楚，在生精细胞凋亡中的作用也所知甚少。基于此，我们拟采用生精细胞分离培养以及小分子干扰技术等，通过研究14-3-3ε和Bim、 Bad、Forkhead间的相互关系，探讨其可能的凋亡通路;利用腺病毒载体技术，观察14-3-3ε过表达对生精细胞凋亡的影响和机制。以期在细胞和分子水平探索精索静脉曲张的发病机制并为治疗靶点的选择提供理论依据。

结论摘要：

1、动物模型的建立 通过对wistar大鼠左肾静脉部分结扎术来构建精索静脉曲张实验组，假手术为对照组，标准条件下饲养大鼠30天后收集左侧睾丸。 2、动物实验部分Tunel实验发现实验组生精细胞凋亡率明显大于对照组且具有统计学意义，证实了模型的可靠性。利用睾丸组织提取蛋白然后进行蛋白组学双向凝胶电泳，生物信息学分析发现实验组凋亡相关蛋白14-3-3ε差异显著，免疫印迹实验验证了实验组14-3-3ε蛋白含量下降，促凋亡蛋白Bax含量升高，BH3-only 促凋亡蛋白家族中的Bim和Puma蛋白也均升高，然而我们研究发现重要的抗凋亡蛋白Bcl-2也出现了升高，免疫组化结果也证实了免疫印迹实验的相关结论并进一步实现了蛋白在生精细胞中的定位。 3、细胞实验部分对GC-1 spg细胞系进行siRNA（实验组siRNA针对14-3-3ε基因,对照组siRNA为随机对照片段）转染，目的为下调14-3-3ε蛋白的表达，通过westernblot来检测siRNA的作用效率，然后通过流式细胞术发现实验组GC-1 spg细胞的凋亡率上升，说明下调14-3-3ε不利于生精细胞的存活，进一步证实了14-3-3ε蛋白在生精细胞抗凋亡过程中发挥着重要作用。 外科干预男性精索静脉曲张治疗结果尚存争议的条件下，在细胞和分子水平探索精索静脉曲张的发病机制并为治疗靶点的选择提供理论依据是解决上述争议的关键所在。我们通过动物和细胞两个水平的实验证实了抗凋亡基因14-3-3ε在生精细胞的凋亡过程中扮演着重要的角色，为精索静脉曲张治疗提供了新的分子靶点及治疗思路。 4.基金资助精索静脉曲张研究发表SCI收录论文1篇，摘要获邀2012美国泌尿外科年会分会口头发言；基金资助精索静脉曲张相关研究投稿2013美国泌尿外科年会1篇