端粒酶(telomerase)是一种核糖核蛋白酶复合物。人端粒酶逆转录酶(hTERT)是人端粒酶复合体的核心限速成分。近年来的研究表明,hTERT在绝大多数肿瘤中表达,而在正常体细胞中极少表达。本研究采用hTERT启动子作为肿瘤靶向元件,通过优化改建序列,提高其在肿瘤细胞中的活性,降低其在正常体细胞中的活性。在优化后的hTERT 启动子序列下游加载GFP报告基因,由高整合率的慢病毒载体转移至裸鼠的肿瘤细胞内特异性的表达,采用激光共聚焦或小动物荧光成像系统,体内外研究hTERT启动子靶向的荧光慢病毒对恶性肿瘤的特异性成像能力。进而,我们将hTERT启动子下游加载治疗基因胞嘧啶脱氨酶(CD)和报告基因GFP双表达,将其构建成hTERT启动子靶向的治疗/显像慢病毒,并通过激光共聚焦或小动物荧光成像系统,体内外实时无创性研究基于hTERT启动子的治疗性慢病毒对恶性肿瘤的靶向杀伤作用及实时疗效评估价值。为基于hTERT启动子的活体光学实时成像技术在肿瘤诊断及治疗效应评估中的应用提供理论依据。
英文主题词telomerase;hTERT promotor;cytosine deaminase; gene therapy;tumor imaging.