针对心血管系统组织工程用可降解支架材料的选择及其分子生物相容性评价需要,特提出用Northern杂交术、激光共聚焦显微观察(CLSM),ET及MTT试剂盒检测等分子生物学技术,研究可降解生物材料与内皮细胞界面反应对内皮细胞几种重要的功能蛋白(内皮素,ET;肌动蛋白,Actin;基质金属蛋白酶-2,MMP-2)mRAN表达的影响及机理,以了解不同化学组成、结构或修饰处理方法的材料对内皮细胞生长、发育
针对组织工程支架材料降解使材料/细胞界面发生变化,同时材料的持续降解会改变组织再生的微生态环境,以及血管化等问题,本项目以聚乳酸(PLA)、壳聚糖(CS)和聚磷酸钙(CPP)及其衍生物为例,以内皮细胞(ECV304)为对象,研究了合成、天然高分子及生物陶瓷三大类可降解材料的表面和降解产物对ECV304血管形成相关行为和几种功能蛋白表达的影响。探讨了材料表面重构与细胞反应的关系。并通过表征降解产物,结合细胞行为,探讨了产物组成和浓度与细胞反应的关系。本课题基本达到了预定目标,取得了预期成果建立了细胞迁移和血管样结构(TLS)的体外定量检测方法;通过研究PLA以及CPP表面ECV304的行为,发现材料表面重构对细胞粘附、铺展、增殖及TLS的形成有显著影响;材料不同的组成、结构及降解时段的降解产物对细胞影响差异显著;VEGF和MMP-2的表达与细胞形成血管行为具正相关性,建议作为材料血管化功能分子水平检测的指标。综上,组织工程用可降解材料的选择和降解的控制应考虑其表面重构和降解产物对内皮细胞生长和血管形成的影响。本研究为促血管化材料选择标准的定量化和分子水平化奠定了科学基础。