中文摘要：

老龄是急性心肌梗死(AMI)发病的高危因素，目前尚无根治AMI的药物和疗法。使用生长因子实施治疗性促血管新生及再生是目前的研究热点，但单一促血管生长因子无法激活完成血管新生和成熟的整个调控过程，且目前治疗策略存在心肌靶向性差、转染效率低、持续时间短等缺点。我们发现老龄梗死心肌表达bFGF和PDGF-BB的水平较低，而bFGF和PDGF-BB是促进血管新生的最佳搭档，联合应用可建立成熟稳定的动脉血管网络。据此，本课题拟采用老龄小鼠AMI模型，构建表达bFGF和PDGF-BB双基因的重组AAV-9载体，靶向转导老龄心肌，进而建立功能性和稳定的侧支循环、改善老龄缺血心肌的灌注和功能；通过检测促血管生长因子、炎症因子及胶原蛋白表达、心梗面积、血流、心功能、新生血管密度及成熟度等指标，阐明双基因转导促进血管新生的分子机制，明确基因靶向干预治疗的有效性及可行性，为基因靶向治疗老龄AMI提供新的思路。

结论摘要：

老龄是急性心肌梗死(AMI)发病的高危因素，目前尚无根治AMI的药物和疗法。针对目前心脏疾病基因治疗载体存在心肌的靶向性差、转染效率低、持续时间短、安全性差等缺点，本课题系统的比较了CMV及CBA启动子重组AAV9载体，发现AAV9-CMV载体对心肌有极强的靶向亲和力，是一种理想的心脏疾病基因治疗载体系统；而AAV9-CBA可介导外源基因在肝脏中靶向、长期稳定的高效表达，是较为理想的肝脏疾病基因治疗载体系统，且两启动子重组AAV9载体对心肌酶、肝功及肾功均无影响。使用生长因子实施治疗性促血管新生及再生是目前的研究热点，针对单一促血管生长因子无法激活完成血管新生和成熟的整个调控过程，本课题设计并构建了表达bFGF和PDGF-BB双基因的重组AAV9载体，体外研究显示bFGF和PDGF-BB的过表达可促进HUVEC的血管新生；PDGF-BB通过抑制Bax和Caspase活性降低缺血缺氧诱导的心肌细胞凋亡；体内研究建立了老龄小鼠的AMI模型，AMI 60d后AAV9-bFGF-PDGF-BB治疗组与AAV9-eGFP相比，心肌梗死面积、心肌间质纤维化及左心室重塑程度显著降低，小鼠心功能明显改善；梗死区新生血管密度显著增加，bFGF和PDGF-BB通过上调血管壁平滑肌标志物α-SMA及血管内皮生长因子VEGF的表达促进老龄心肌梗死区血管新生。表明AAV9-bFGF-PDGF-BB靶向转导治疗老龄AMI是有效可行的，为血管新生疗法治疗老龄AMI提供了新的思路。