本课题以斑点叉尾鮰加工副产物鱼皮为原料,采用酶解技术制备降血压肽,进而研究(1)降血压肽的氨基酸序列;(2)消化酶对降血压肽的作用以及降血压肽的吸收模式;(3)降血压肽对血管紧张素转化酶的抑制作用方式,降血压肽与血管紧张素转化酶的作用位点、作用模式;(4)高血压大鼠口服降血压肽后对其体内血压相关生理生化指标的影响,以及降血压肽对高血压大鼠血压调控基因表达的影响等。通过以上几个方面的研究,系统阐述鮰鱼皮明胶降血压肽在体内的作用机理。本课题的成功实施将为开发安全、高效的食源性降血压肽提供理论依据,为鮰鱼皮这一低值资源的高值化利用寻求理论支持。
ACE inhibitory peptide;antihypertensive;structure-activity relationshi;mechanism;
本项目以斑点叉尾鮰加工副产物——鱼皮为原料,采用酶解技术制备降血压肽,水解液经分离、纯化并经质谱鉴定得到2条具有ACE抑制活性的多肽(肽1FTHNGYLNA;肽2SNTRVSAHKHCGSYLIIN);对ACE抑制肽的特性研究结果表明这2条多肽对温度、pH、K+、Zn2+、Ca2+、Mg2+、Cu2+均具有较好的稳定性,胃液的作用可一定程度的提高其ACE抑制活性,肠液的作用对其ACE抑制活性有降低作用; ACE抑制肽的体内降血压试验结果表明,ACE抑制肽灌胃给药SHR大鼠2h后,大鼠的血压显著降低,长期给药作用表明ACE抑制肽的降血压作用呈剂量依赖性,同时可显著抑制大鼠体内ACE的活性,减少Ang II的生成;对ACE抑制肽的吸收机制的研究发现ACE抑制肽可能主要是通过细胞旁路转运穿过小肠上皮细胞,而且没有外排作用;通过对ACE抑制肽的酶反应抑制动力学参数研究和计算机模拟胃肠道酶裂解作用分析发现本研究所制备得到的2条具有ACE抑制活性的多肽,其酶反应抑制类型均属于非竞争性抑制,计算机模拟消化酶裂解作用分析可知,经胃蛋白酶作用后,裂解后得到的多肽ACE抑制活性有一定提升,再经胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶作用后,C-端活性氨基酸被降解掉,ACE抑制活性有一定的降低。