液相悬浮芯片技术是近年来发展起来的一种全新的可广泛应用于临床诊断、生命科学研究和许多其他领域的高通量快速检测平台技术。荧光编码微球的种类和制备方法决定了该技术的应用范围和成本,而现有的荧光编码微球远远不能满足实际需要。本申请提出了一种有别于其他制备荧光编码微球的方法将带有同种功能基团并具有不同荧光发射波长的几种共轭高分子按不同比例混合,然后通过部分功能基与表面具有对应官能团的单分散聚合物微球进行反应,从而获得一系列表面具有生物分子反应位点、荧光分子与微球表面以共价键稳定相连、不同荧光发色波长和发射强度组合的荧光编码微球。优化实验条件、探索分子结构与微球荧光性能的关系,并总结规律、将之发展成为一种可控性较好的直接带有反应位点的共轭高分子荧光编码微球的制备方法。
Conjugated Polymer;Fluorescent Microspheres;Encoding;Surface Reactive Site;Flow Cytometry
以流式细胞仪为主要代表的液相悬浮芯片技术是一种可广泛用于临床诊断、生命科学研究等高通量快速检测平台技术。荧光编码微球的种类和制备方法决定了该技术的应用范围和成本,而现有的荧光编码微球远远不能满足实际需要。以往的研究主要是基于荧光染料或量子点等来制备荧光编码微球。本申请主要以共轭高分子为主要荧光负载物质,以商品化的单分散的尺寸在微米的高分子微球作为基质微球制备荧光编码微球。研究从几个方面展开。(1)将通过交叉偶合方法合成的聚对芳撑乙炔(PAE)分为不同荧光发射波长的几种共轭高分子,按不同比例混合制备了巨大数量的荧光微球;并通过功能基与表面具有对应官能团的单分散聚合物微球进行反应,从而获得表面具有生物分子反应位点、荧光分子与微球表面以共价键稳定相连的荧光微球。(2)运用Wessling 法合成聚对亚苯基亚乙烯( PPV); 将PPV的前驱体(pre-PPV)通过静电吸附到表面带有负电荷的基质微球然后热消除获得荧光微球,通过改变热消除条件或控制前驱体取代程度等方法,成功地调节了荧光微球的发射波长和发射谱图的形状从而具备丰富的荧光信号实现编码;(3) 通过层层自组装在微球表面覆盖多层高分子的荧光微球,探讨不同高分子间隔层对PPV荧光的影响规律并且引入交联,最后获得具有稳定外壳具有表面反应位点的荧光微球。(4)其他一些体系的探索。通过多方面多种手段的表征,表明所获得的荧光微球除了荧光性能满足研究目标外,样品的单分散尺寸,均匀的表面形态和稳定性等也基本符合实际应用的要求。