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最小弧菌外毒素基因的克隆、表达及基因工程疫苗研制
  • 项目名称:最小弧菌外毒素基因的克隆、表达及基因工程疫苗研制
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30371106
  • 申请代码:C190604
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2004-01-01-2006-12-31
  • 项目负责人:吴后波
  • 负责人职称:副研究员
  • 依托单位:中国科学院南海海洋研究所
  • 批准年度:2003
中文摘要:

本项目以海水养殖真鲷弧菌病病原菌最小弧菌为研究对象, 利用现代分子生物学的理论与方法,通过对该菌的外毒素基因进行克隆与表达,弄清外毒素基因的核酸序列及结构特征, 通过基因工程的方法制备有效的防治疫苗。这不仅对海洋水产病害学这一新兴学科的理论发展具有重要意义, 而且对海水养殖业的持续和健康发展具有重大实用价值。

结论摘要:

本项目以海水养殖真鲷弧菌病病原菌最小弧菌为研究对象,利用现代分子生物学的理论与方法,通过对该菌的外毒素基因进行克隆与表达,从最小弧菌基因组DNA中扩增出1338bp目的片段,将其转化至质粒PQE-2,构建表达载体PQE-2/VmhA,转导至宿主大肠杆菌M15(PREP4),获得重组蛋白,表达的重组蛋白保留了外毒素的免疫原性,可作为基因工程疫苗的候选抗原。用浓度为0.2%的福尔马林对浓度为5mg/ml的表达外毒素进行灭活处理,得到的灭活疫苗为基因工程疫苗,该疫苗的免疫保护率可达80%,注射免疫的免疫保护率比浸泡免疫的高。本项目弄清了外毒素基因的核酸序列及结构特征,通过基因工程的方法制备了有效的防治疫苗。这不仅对海洋水产病害学这一新兴学科的理论发展具有重要意义,而且对海水养殖业的持续和健康发展具有重大实用价值。


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
  • 专利
  • 获奖
  • 著作
  • 7
  • 0
  • 0
  • 0
  • 0
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