本项目以海水养殖真鲷弧菌病病原菌最小弧菌为研究对象, 利用现代分子生物学的理论与方法,通过对该菌的外毒素基因进行克隆与表达,弄清外毒素基因的核酸序列及结构特征, 通过基因工程的方法制备有效的防治疫苗。这不仅对海洋水产病害学这一新兴学科的理论发展具有重要意义, 而且对海水养殖业的持续和健康发展具有重大实用价值。
本项目以海水养殖真鲷弧菌病病原菌最小弧菌为研究对象,利用现代分子生物学的理论与方法,通过对该菌的外毒素基因进行克隆与表达,从最小弧菌基因组DNA中扩增出1338bp目的片段,将其转化至质粒PQE-2,构建表达载体PQE-2/VmhA,转导至宿主大肠杆菌M15(PREP4),获得重组蛋白,表达的重组蛋白保留了外毒素的免疫原性,可作为基因工程疫苗的候选抗原。用浓度为0.2%的福尔马林对浓度为5mg/ml的表达外毒素进行灭活处理,得到的灭活疫苗为基因工程疫苗,该疫苗的免疫保护率可达80%,注射免疫的免疫保护率比浸泡免疫的高。本项目弄清了外毒素基因的核酸序列及结构特征,通过基因工程的方法制备了有效的防治疫苗。这不仅对海洋水产病害学这一新兴学科的理论发展具有重要意义,而且对海水养殖业的持续和健康发展具有重大实用价值。