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siRNA抑制百合无症病毒(LSV)表达的研究
  • 项目名称:siRNA抑制百合无症病毒(LSV)表达的研究
  • 项目类别:面上项目
  • 批准号:30771760
  • 申请代码:C1612
  • 项目来源:国家自然科学基金
  • 研究期限:2008-01-01-2010-12-31
  • 项目负责人:徐品三
  • 负责人职称:副教授
  • 依托单位:大连理工大学
  • 批准年度:2007
中文摘要:

百合无症病毒(LSV)是导致百合球根退化的主要病害,到目前为止还没有很有效的方法来防治。RNA 干扰作为一项新的反向遗传学技术,正在越来越多地应用于植物病毒抗性研究,为工程化植物抗病毒遗传育种提供了一个高效、特异的抗性获得手段。本研究运用基因扩增、Gateway技术和转基因技术,以及植物中转录后基因沉默-PTGS的作用原理,设计合适dsRNA与Gateway表达载体相连后,通过农杆菌介导法将病毒的特定siRNA导入百合,通过瞬时表达检测和PCR检测,证明RNAi在百合病毒防治上的有效性,并获得了抗病性植株。利用PCR重组技术构建百合无症病毒和百合斑驳病毒(LSV-LMoV)双抗表达载体,分别转化东方百合"索邦"和铁炮百合"白天堂"子球鳞片,同时确定可作为定量分析的内参基因,通过RT-PCR实时定量检测,获得了22%和8%的转基因个体。通过生物信息学软件,分析了百合无症病毒衣壳蛋白(CP)基因和复制酶(RdRp)基因的碱基序列、编码蛋白结构和功能。进一步优化了无病毒百合组培种球培养条件,建立了组培种球快速繁殖体系,为根治百合病毒病,解决我国百合种球依赖进口的现状提供了理论参考。

结论摘要:

英文主题词Lily symptomless virus; RNA interference; siRNA; Sequence analysis ;Genetic transformation


成果综合统计
成果类型
数量
  • 期刊论文
  • 会议论文
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