中文摘要：

肿瘤是人类的顽疾，而转移是肿瘤治疗失败的主要原因。目前肿瘤的转移机理不明。研究证实Wnt通路和S100家族蛋白与多种肿瘤的发生及转移有关。但在涎腺腺样囊性癌研究领域中，Wnt通路是否与SACC转移有关?S100蛋白是否调控SACC转移?以及Wnt与S100蛋白之间的调控关系，均未知。本研究拟以一对来源相同但转移能力不同的涎腺腺样囊性癌细胞系SACC-83和SACC-LM为研究对象，来探讨肿瘤转移的机理。通过前期研究发现:Wnt2B、Wnt3A、Wnt5A、Wnt6、Wnt7B、Wnt11、Wnt16、S100A6、S100A7、S100A8、S100A9、S100A12、S100P在高转移细胞系中表达均增高，因此我们提出研究假设"WNT蛋白通过S100蛋白来调控SACC转移"，拟通过免疫组化、Real time PCR、Western blot、及Wnt通路抑制实验等手段加以深入研究。

结论摘要：

肿瘤是威胁人类生命的顽疾，转移是肿瘤治疗失败的主要原因。目前肿瘤的转移机理不明。以往研究证实Wnt通路和S100家族蛋白与多种肿瘤的发生及转移有关。但在涎腺腺样囊性癌研究领域中未知。本研究以一对来源相同但转移能力不同的涎腺腺样囊性癌同源异质细胞系SACC-83和SACC-LM为研究对象，首先检测和S100家族蛋白和Wnt家族蛋白在这两个细胞系的表达模式，其次再利用人重组S100P蛋白处理SACC-83细胞，通过CCK8实验、划痕实验和Transwell侵袭实验，初步判定S100P在SACC转移中的作用。最后利用转外源基因或shRNA质粒，建立稳定高表达S100P的SACC-83细胞系、敲低S100P的SACC-83-shS100P细胞系和Wnt通路激活的SACC-83-AW细胞系、并以此3种细胞系及SACC-83、SACC-LM细胞系为模型，利用免疫组化、Real time PCR、 Western blot、划痕实验和侵袭实验、通路抑制实验等技术来探讨SACC肿瘤转移的机理。CCK8实验、划痕及侵袭实验结果显示S100P与Wnt蛋白在SACC-LM细胞中高表达；但人重组S100P蛋白处理与未处理的SACC-83相比，S100P蛋白处理过的SACC细胞的增殖数例、运动距离和侵袭细胞数量之间无统计学差异（P>0.05）。而稳定转染S100P基因的SACC-83-S100P细胞系、稳定敲低S100P的SACC-83-shS100P细胞系均可以促进SACC细胞的运动和侵袭能力（P<0.05），其机理是通过上调MMP3和MMP14表达而实现的。这提示S100P与SACC-83的运动、侵袭能力无关。在激活Wnt通路细胞系SACC-83-AW和SACC-83的Wnt通路抑制试验的结果激活Wnt通路后，SACC-83的运动和侵袭能力显著增强，但S100P的表达量未见增高，这提示Wnt通路与SACC转移关系密切。Real time PCR和Western Blot结果进一步揭示SACC-83-AW具有高运动侵袭能力是因为其高表达MMP2、p-Akt、和COX2。但在SACC-LM中仅COX2、MMP9和MMP14表达高，这提示SACC-83-AW与SACC-LM具具有的高侵袭能力的机制可能不同。结论SACC的转移机制仍不甚清楚，通过本课题的研究S100P与SACC-83和SACC