肾在祖国医学中具有极为重要的地位,肾为先天之本、肾主藏精,其精气促进人体的生长、发育和生殖,是人体生命活动的原动力。现代医学与生命科学发现人体的发育始于受精卵,而受精卵本身就是一种全能干细胞;受精卵以及随后形成的胚胎干细胞体系构成机体生长发育与修复的源泉。项目根据课题组既往研究过程中初步观察到的一些现象拟在实验体系中将二者结合,从中医肾的角度理解胚胎干细胞,观察补肾(滋肾阴、温肾阳)对胚胎干细胞增殖、衰老、凋亡等基本生命活动的影响,以及补肾对胚胎干细胞功能关键决定基因Wnt 、Bmi-1、Nanog、Oct4、P16INK4a等基因转录、表达以及功能的影响,并进一步以siRNA技术验证补肾对相关基因功能的促进或阻滞。项目的完成将为中医肾理论研究以及正在进行的胚胎干细胞研究提供新的线索与起点。
肾为先天之本、肾主藏精,其精气促进人体的生长、发育和生殖,是人体生命活动的原动力。现代医学与生命科学发现人体的发育始于受精卵,受精卵以及随后形成的胚胎干细胞体系构成机体生长发育与修复的源泉。项目组从中医肾的角度理解胚胎干细胞,在实验体系中将二者结合,选用胚胎干细胞模型CRL-1825细胞株,加入补肾阳及补肾阴中药复方大鼠含药血清,采用CCK8试剂、TUNEL法、流式细胞术、RT-PCR法、Western blot、RNA干扰等技术,观察补肾对胚胎干细胞增殖、分化、凋亡等基本生命活动及关键基因表达、功能的影响。结果显示补肾阴中药复方含药血清可以抑制胚胎干细胞的分化和凋亡,促进其增殖及细胞周期的进程,促进干细胞Wnt、Oct4等基因的表达,抑制P16INK4a基因的表达,通过RNA干扰技术阻断Wnt、Oct4基因表达后,补肾阴中药复方含药血清再不能阻滞干细胞的凋亡,说明其对干细胞凋亡的阻滞作用与促进Wnt、Oct4基因的表达相关;补肾阳中药可以在一定程度上影响干细胞分化、凋亡,促进干细胞Notch基因的表达,抑制P16INK4a基因的表达。本研究将为中医肾理论、胚胎干细胞研究提供一定线索。