苜蓿的秋眠性指秋季植株生长速度下降或停止生长、茎枝匍匐生长的现象,是选择栽培品种时的首要指标。本课题从分子水平研究苜蓿主要光受体光敏色素 A、B 基因(phyA、phyB)与其秋眠性的关系,旨在揭示苜蓿秋眠性的调控机理。采用RACE和染色体步移法,克隆并鉴定了紫花苜蓿phyA、phyB的全长基因序列;采用 FQ-PCR SYBR-Green 方法,测定了不同光周期和温度条件下三种秋眠类型苜蓿 phyA、phyB mRNA的表达水平。结果表明1)短日照条件下秋眠型苜蓿叶片中phyB mRNA表达量最大,且秋眠型>半秋眠型>非秋眠型,相对于phyA,phyB对光周期的变化反应更敏感;2)phyA 在高温条件下的mRNA 表达量高于低温条件下的表达量,phyB则相反,并且光和温度在影响光敏色素含量方面有互作;3)外源ABA喷施量的增加使苜蓿体内ABA/IAA和ABA/GA3比例上升,且phyB含量和ABA升降有其一致性;4)本研究中,光敏色素 A、B 双元表达载体已成功构建并鉴定,农杆菌介导转化的转基因植株已进行至继代选择培养阶段,转基因植株幼苗将很快移栽大盆,已基本完成预期任务目标。
英文主题词alfalfa;phyA;phyB;regulation;fall dormancy