中文摘要：

TNF家族的B细胞激活因子（BAFF）过表达与多种自身免疫性疾病的发生和发展密切相关。本项目在已克隆和表达人可溶性BAFF（sBAFF）的基础上，经PCR构建缺失不同长度的sBAFF cDNA突变体，然后分别与鸡卵清溶菌酶（HEL）T辅助细胞（Th）表位DNA序列重组，继而将重组DNA克隆于原核表达载体，制备由sBAFF缺失突变体和HEL Th表位组成的融合蛋白并证实其已丧失正常sBAFF的活性，最后以融合蛋白免疫正常小鼠和以人外周血单个核细胞重建免疫功能的裸鼠，观察融合蛋白交叉诱导抗人sBAFF抗体的情况以及相应抗体抑制人天然sBAFF活化淋巴细胞的功能。本项目通过率先探讨以异源性Th表位修饰的人sBAFF缺失突变体来交叉诱导抗人天然sBAFF抗体的可行性，旨在为BAFF相关的多种自身免疫性疾病的治疗和复发预防提供一种具有诸多优点的新型（乃至特效的）候选分子。

结论摘要：

TNF家族的B细胞活化因子（BAFF）是TNF配体家族的一个重要成员，在B细胞的成熟和存活中起着重要作用。BAFF过表达密切参与了SLE、RA及SS多种自身免疫性疾病的发生和发展，被认为是治疗这些自身免疫性疾病的理想靶标。在本项目中，首先构建了缺失不同区域的sBAFF cDNA突变体(msBAFF)，然后将Th表位DNA序列分别与上述突变体重组并克隆于原核表达载体；重组蛋白在大肠杆菌中获得了高效表达，并经Ni-NTA亲和层析系统纯化；用重组蛋白免疫的BALB/c小鼠体内产生了高滴度的抗BAFF抗体，并且这些小鼠血清可以抑制重组人sBAFF和天然sBAFF刺激淋巴细胞增殖的功能；用重组蛋白免疫人源化SCID小鼠后，在其血清中检测到抗人BAFF抗体的存在，并且免疫SCID小鼠血清中的抗体可抑制重组sBAFF刺激淋巴细胞增殖的功能。这些结果表明，Th表位修饰的重组sBAFF突变体蛋白可在体内诱导抗BAFF中和抗体的产生。本研究为进一步探讨所制备重组蛋白的治疗作用奠定了基础，并为BAFF相关自身免疫性疾病的治疗提供了一种新的候选策略。