中文摘要：

原发性肝癌是恶性程度最高的肿瘤之一。自杀基因疗法，又名基因介导的酶-前药疗法，具有治疗肝癌的潜能。本研究将木薯来源的linamarase(lis)引入肝癌基因治疗中，利用其水解前体药物linamarin(lin)，并产生毒性代谢产物HCN的特性，从而实现对肝癌细胞的杀伤。通过建立lis稳转肝癌细胞系，发现lis本身对细胞生长，细胞周期等特性并无影响。此外单独使用前体药物lin也未发现细胞毒性，从而提示了该策略的安全性。为提高目的基因的表达及针对肝癌的靶向性，我们以ViraPower?病毒载体系统为基础，分别构建CMV及AFP启动子引导的lis腺病毒载体。体外实验表明，含CMV启动子的腺病毒联合lin具备针对多种肝癌细胞的强大抑制效应及旁观者效应。而含AFP启动子的病毒仅具备对AFP阳性肝癌细胞的特异性杀伤，对其他肿瘤细胞则无明显抑制效应，从而体现了其针对肝癌的特异性和靶向性。动物实验提示lis能特异性表达于肝癌组织中，联合使用lin后能显著抑制肿瘤生长并延长动物存活时间。以上结果表明，lis/lin系统能应用于肝癌的的靶向基因治疗中，值得进一步深入研究。