中文摘要：

RNAi技术是应是用21～23 bp siRNA诱导与其序列同源的mRNA降解的过程。目前RNAi在抑制HBV的研究方面取得了很大进展。由于HBV复制过程存在不断变异，即使同一个体的HBV也是以准种存在的；然而当前研究都是针对某一个HBV序列设计的与其完全配对的siRNA或shRNA，效果良好并不能说明对准种池内的其他HBV同样有效。目前已有报道个别位点错配的siRNA对Fen1基因仍能发挥良好干扰作用。我们已通过细胞模型研究发现2～4个位点错配的shRNA能明显抑制重组HBV的复制和表达。为进一步研究错配的shRNAs在小鼠体内对HBV的抑制作用，我们拟把多个针对HBV不同位点错配的shRNAs分别与重组HBV共同注进小鼠体内，应用ELISA、RT-PCR和Southern blot技术观察错配shRNAs对HBsAg、HBeAg表达水平，相应蛋白的mRNA水平及HBV 复制的抑制作用。

结论摘要：

RNA干扰技术是应用21～23 bp siRNA诱导与其序列同源的mRNA降解的过程。目前RNAi在抑制HBV的研究方面取得了很大进展，但错配的小干扰RNA对HBV抑制的研究仍然匮乏。由于HBV复制过程存在不断变异，基于这方面的考虑，本课题研究了错配的小干扰RNAs对HBV抑制的作用。本研究首先设计针对已知HBV序列完全配对的小干扰RNAs，体外细胞实验筛选出干扰效果好的小干扰RNAs，然后根据genebank提供的HBV序列，分析容易错配的位点，进行设计错配的小干扰RNAs，然后进行细胞实验，筛选出干扰效果好的错配小干扰RNAs，进行动物实验。我们把多个针对HBV不同位点错配的shRNAs分别与重组HBV共同注进小鼠体内，应用ELISA、RT-PCR和Southern blot等技术，结果表明错配shRNAs对HBsAg、HBeAg表达水平，相应蛋白的mRNA水平及HBV 复制均有明显的抑制作用。