中文摘要：

胚胎着床是一个十分复杂的生理过程，生长因子、细胞因子、转录因子等在胚胎着床过程中发挥着重要的调控作用。早期生长反应因子1（Egr1）是一种含3个锌指结构的转录因子，主要参与卵泡发育、排卵、黄体退化、乳腺发育以及胎盘血管发生等生理过程。我们前期研究发现，Egr1在小鼠子宫胚胎着床位点表达显著上调，提示Egr1可能与小鼠胚胎着床过程密切相关。关于Egr1在胚胎着床过程中的功能与调节目前尚未见报道。本项目拟利用早期妊娠、假孕、人工诱导蜕膜化、延迟着床等多种动物模型，采用原位杂交、基因过表达、反义寡核苷酸等技术，研究Egr1在小鼠胚胎着床期子宫中的表达规律，探讨Egr1与胚胎着床相关基因p53、VEGF-A、mPGES-1、MMP-9等的关系，揭示Egr1在小鼠胚胎着床过程中的作用及其机制，为进一步阐明胚胎着床的分子机理、动物繁殖率的提高及不孕症的治疗等提供理论依据。

结论摘要：

本研究利用小鼠早期妊娠、假孕、诱导蜕膜化、延迟着床及着床激活等多种动物模型，采用原位杂交、基因过表达、RNAi等技术，研究Egr1在小鼠胚胎着床期子宫中的表达及其对小鼠胚胎着床的影响，探讨Egr1与胚胎着床相关基因Trp53、Mmp9、Cox-2、mPGES-1、Vegf及着床相关激素（雌激素、孕酮和GH）等的关系。结果发现，在妊娠第5天和着床激活子宫中，Egr1高表达于围绕胚泡的子宫腔上皮下基质细胞中，提示Egr1可能参与了小鼠胚胎着床过程。为了进一步证实Egr1的作用，妊娠第3天小鼠一侧子宫角注射Egr1 siRNA片段，另一侧注入对照siRNA片段，于妊娠第5天检测发现，与对照组相比，注射Egr1 siRNA会导致小鼠胚胎着床位点数显著下降，证实了Egr1在小鼠胚胎着床过程中的作用。作为转录因子，Egr1可通过调控下游的靶基因来发挥作用。在小鼠子宫基质细胞中，转染Egr1 siRNA后，Trp53和Mmp9的表达显著下降；而转染Egr1过表达载体后，Trp53和Mmp9的表达显著升高。子宫角注射Egr1 siRNA后，Trp53和Mmp9在着床位点的表达也会下降。这些结果表明，Egr1在小鼠胚胎着床过程中可通过调控Trp53和Mmp9基因来发挥作用。与此同时，子宫角注射Egr1 siRNA后，胚胎着床位点血管通透性显著下降，进一步研究发现，Egr1可通过调控Cox-2、mPGES-1和Vegf的表达进而影响着床位点血管通透性。在子宫基质细胞中，GH和IGF-1可诱导Egr1的表达。Egr1表达在妊娠6-8天小鼠子宫蜕膜化细胞中，且在人工诱导蜕膜化和体外基质细胞诱导蜕膜化模型中，Egr1的表达下降。转染Egr1过表达载体可抑制蜕膜化标志分子Dtprp在子宫基质细胞中的表达，而子宫角注射Egr1 siRNA则可促进Dtprp的表达；在体外诱导蜕膜化过程中，转染Egr1 siRNA会导致Dtprp的表达升高，这些结果表明，Egr1可抑制小鼠子宫发生蜕膜化反应。雌激素和孕酮可调控Egr1在卵巢切除小鼠子宫和子宫基质细胞中的表达，而cAMP和H89则对Egr1在小鼠子宫基质细胞中的表达无明显作用。研究结果可为进一步探明哺乳动物胚胎着床机理提供依据。