中文摘要：

幽门螺杆菌是人类最常见的致病菌，与消化性溃疡、MALT淋巴瘤和胃癌有重要关系，而药物治疗毒副作用明显、耐药菌株的产生以及难以解决H. pylori复发等问题，因而疫苗的研制成为了热点。本课题针对H. pylori疫苗研制的各个环节设计了rBCG-UreB疫苗利用DNA重组技术，以BCG作为疫苗的载体，用PCR方法扩增H. pylori UreB编码基因，同时从BCG基因组中扩增信号肽序列，在体外将信号肽序列与尿素酶连接，克隆至穿梭表达载体pBCG中，将重组质粒导入BCG中表达，构成rBCG-UreB，以研究其抗H.pylori感染的作用与机制，为彻底预防和治疗H.pylori所致的相关疾病寻找一种更有效、更安全的疫苗。该疫苗具有其他疫苗不可比拟的优越性，即具有毒副作用小、安全、生产工艺简单，不需要纯化，成本低，本身是很强的免疫佐剂，单次接种，终身带菌，可使机体产生长期的细胞和体液免疫。

结论摘要：

幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, Hp)是慢性胃炎和消化性溃疡的重要病因，与胃癌和胃MALT淋巴瘤的发病也有密切关系。目前临床上常用的三联疗法不足以根治Hp感染。免疫接种被认为是彻底消除Hp感染的有效措施。重组活载体疫苗具有无需纯化抗原、无需佐剂、可避免抗原在胃内的降解和变性等优点，被认为是最有开发和应用前景的疫苗。本研究通过克隆人结核分枝杆菌热休克蛋白70(hsp70)基因启动子、Mas 启动子及β-内酰胺酶启动子，并将人HpUreB cDNA和 Omp18 cDNA分别克隆入载体pJM、pLA71和pLA73中，构建了非分泌型和分泌型大肠杆菌-分枝杆菌穿梭表达载体。利用电穿孔方法将其转入M.S中，构建rM.S疫苗株，通过PCR 鉴定、限制性酶切分析鉴定定所构建的重组M.S疫苗株的正确性，并对其表达、体内外稳定性及体内定植和安全性进行研究。选择SPF级BALB/c小鼠构建Hpylori定植模型，利用构建的rM.S疫苗通过灌胃免疫BALB/c小鼠，观察疫苗对小鼠的抗Hp免疫保护效果，并对免疫保护机理作出初步的理论探讨?。