中文摘要：

本项目拟在前期的稳定性冠心病（CAD）患者内皮祖细胞（EPC）数量、黏附和迁移功能变化的基础上，首先进一步观察CAD患者EPC的在体血管生成能力和旁分泌功能的变化。为明确其机制，拟观察CAD患者EPC ROS水平，NADPH氧化酶、抗氧化酶、NO活性，GPx、MnSOD的表达，NADPH氧化酶各亚单位、Akt、eNOS、ERK1/2、p38MAPK的表达及磷酸化水平，p47phox与NOX2、NOX4结合及膜转位情况；然后采用化学抑制剂或siRNA抑制NADPH氧化酶、eNOS、p38MAPK、ERK1/2、Akt及PKC表达，以进一步明确氧化应激在CAD患者EPC变化中的作用及NADPH氧化酶影响EPC功能和衰老的上、下游信号转导机制。本项目的系统研究有望进一步深入、系统地阐明CAD患者EPC变化及机制，将为改善CAD患者EPC功能提供新的治疗靶点，并为临床进一步应用EPC提供技术保障。

结论摘要：

本项目在前期稳定性冠心病（CAD）患者内皮祖细胞（EPC）数量、黏附和迁移功能变化的基础上，进一步观察CAD患者EPC的在体血管生成能力和旁分泌功能的变化。为明确其机制，观察了CAD患者EPC ROS水平，NADPH氧化酶、抗氧化酶、NO活性，GPx、MnSOD的表达，NADPH氧化酶各亚单位、Akt、eNOS、ERK1/2、p38MAPK的表达及磷酸化水平，p47phox与NOX2、NOX4结合及膜转位情况；然后采用化学抑制剂或siRNA抑制NADPH氧化酶、eNOS、p38MAPK、ERK1/2、Akt及PKC表达，以进一步明确氧化应激在CAD患者EPC变化中的作用及NADPH氧化酶影响EPC功能和衰老的上、下游信号转导机制。目前该项目已经基本完成，获得以下结论 1.稳定型冠心病患者EPCs内NADPH氧化酶激活，ROS产生增加，MDA水平增高，反应了高氧化应激水平。 2. 稳定型冠心病患者EPCs内抗氧化酶SOD和CAT活性降低，NO分泌减少，旁分泌IL-8、VEGF、SDF-1和HGF功能和在体成血管能力减弱。 3. 稳定型冠心病患者EPCs内NADPH氧化酶各亚基表达均增加，并通过p47phox活化转位至胞膜并与Nox2亚单位结合而激活，其中PKCα/β2 信号途径可能参与激活。 4. 稳定型冠心病患者EPCs中，NADPH氧化酶对p38MAPK、ERK和PI3K/Akt/eNOS信号通路的激活有重要的调节作用。 5. 稳定型冠心病患者EPCs中, P38MAPK信号通路与EPCs衰老和粘附有关，ERK信号通路与EPCs迁移和粘附有关，而PI3K/Akt/eNOS信号通路与EPCs衰老密切相关。 NADPH氧化酶在冠心病EPCs功能发挥中具有重要作用，它可能通过p38MAPK、ERK和PI3K/Akt/eNOS信号通路影响EPCs的迁移、粘附和衰老。本项目的系统研究进一步深入、系统地阐明CAD患者EPC变化及机制，将为改善CAD患者EPC功能提供新的治疗靶点，并为临床进一步应用EPC提供了技术保障。