中文摘要：

在低表达低转移黑色素瘤细胞株B16中转入正常或突变prl-3基因，构建B16-prl-3(m)细胞株，在高表达高转移的B16-BL6中用RNAi或negative-domain等技术构建B16-BL6-prl-3-null细胞株。比较上述细胞株生物学特征、逃逸宿主免疫监视、体内外转移能力和血管新生等变化，证实其直接调控转移作用及环节和方式。探索去磷酸活性、prenylation与亚细胞定位、参与的信号转导等与调控转移的关系，阐明其调控转移的机制。比较临床上不同种类肿瘤原发灶和转移灶间的表达差异，探索其与转移预后的关系。在此基础上，探讨相关的基因工程细胞株及体内外模型用作转移研究和药物研制新平台的可行性。本研究可望证实PRL-3直接调控转移作用，阐明其调控转移的环节、方式及机制，且可评价其作为抗转移新靶点的可行性和科学性，为针对PRL-3的抗转移药物设计与研制奠定基础。

结论摘要：

本项目在低转移黑色素瘤细胞株B16细胞中转入prl-3基因，构建了高表达PRL-3的B16-prl-3细胞株，在体内外考察了对细胞生长和转移的影响，探讨了PRL-3促肿瘤转移的机制，在此基础上建立用作转移研究和药物研制的新平台。结果发现，与转入空载体的对照细胞相比，B16-prl-3细胞的形态变得更细长，表现为成纤维细胞样；迁移和浸润能力显著增加；与fibronectin或laminin的粘附能力以及在fibronectin上的伸展能力提高。PRL-3特异的反义核苷酸及磷酸酶抑制剂Na3VO4或bpV几乎完全阻断PRL-3对细胞迁移能力的提高及粘附能力的改变。移植B16-prl-3细胞的小鼠肺和肝脏的肿瘤细胞浸润与转移程度明显高于对照组，PRL-3在体外能促进细胞的增殖，在体内能加速肿瘤的生长。PRL-3的CCVM序列参与了PRL-3的细胞内定位和肿瘤转移，其中170位半胱氨酸是最为关键的位点。PRL-3分子定位于细胞的质膜上，且PRL-3的功能与其质膜定位密切相关，这为阐明PRL-3参与的信号通路指明了方向。在此基础上我们成功地建立了有效的体内肺和肝转移模型。